| 研究概要 |
1.ヒト単核白血球のmRNAを簡便に測定する方法を確立した。
ヒト単核白血球のG蛋白mRNAより、キット(Gene Plate^<TM>,Hitachi Chemical Research Center)を用いてcDNAを合成した後、G蛋白に特異的なビオチンラベルしたプライマーを用いてPCR法で25サイクル程度増幅した。PCR生成物をマイクロタイタ-プレートに固定されたG蛋白サブタイプごとのプローブとハイブリダイズさせた後洗浄し、ストレプトアビジン-アルカリフォスファターゼ複合体を加えてG蛋白cDNAのビオチン部分と反応させ、基質(PNPP)を加えて発色させたものをマイクロプレートリーダー(405nm)で比色定量した。この測定法の確立により、同時に多検体を簡便に測定することが可能となった。また、サンプルはcDNAの形で長期間保存でき、いつでも他の遺伝子に関する研究に利用できるという利点がある。
2.上記方法を用いて、うつ病患者のG蛋白αサブユニットmRNAを各サブタイプ別に測定した。うつ病患者15例(メランコリー型大うつ病11例,非メランコリー型大うつ病4例)と健常対照者15例の比較を行なったが、どのG蛋白サブタイプに関しても有意な差はみられなかった。
3.他の精神障害患者(精神分裂病、強迫性障害、パニック性障害)についても同意を得た上で同様の測定を数例行なったが、特異的な結果は得られなかった。
4.感情障害患者血小板における5-HT刺激性Ca反応は、双極性うつ病をメランコリー型大うつ病で健常対照群に比して有意に亢進していた。また、トロンビン刺激性Ca反応は双極性うつ病で亢進がみられた。
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