| 研究課題/領域番号 |
04454508
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| 研究機関 | 大分医科大学 |
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研究代表者 |
清水 正嗣 大分医科大学, 医学部, 教授 (90013846)
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| 研究分担者 |
木村 光孝 九州歯科大学, 歯学部, 教授 (70047801)
河野 憲司 大分医科大学, 医学部, 助手 (50214664)
松島 りん太郎 大分医科大学, 医学部, 助手 (10209546)
水城 春美 大分医科大学, 医学部, 講師 (40145397)
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| キーワード | 口腔領域腫瘍 / 口腔癌 / 臨床的悪性度 / 治療法選択 / 増殖能 / 浸潤能 / 抗癌剤感受性 |
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| 研究概要 |
本研究初年度(平成4年度)は、健常粘膜と炎症粘膜由来の上皮細胞、上皮性腫瘍細胞を用いて、培養条件の設定、培養液の選択、培養結果の安定性の確認を主体に実験を行った。
具体的には20%牛胎児血清添加Dulbecco改変Iscove培地を用いて(1)分散培養法と(2)組織片静置培養により健常粘膜と炎症粘膜由来の上皮細胞の培養を実施した。その結果、(1)では線維芽細胞が目的とする上皮細胞を上回って増殖するため、上皮細胞の回収がはなはだ困難であった。一方、(2)では上皮細胞が早期に組織片から増殖・遊出するので、上皮細胞を選択的に増殖させることが(1)に比べて確実であった。しかし線維芽細胞の混入を完全に防ぐことは困難であったので、線維芽細胞のみをデイシュから機械的に剥離除去するなど操作をくわえた。
また口腔粘膜扁平上皮癌細胞の培養についても、癌組織を入手できたため、平成5年度実施の予定を早めた。癌細胞も上記の非腫瘍性上皮細胞の結果と同様に、線維芽細胞の除去が困難であった。本研究の目的は癌細胞初代培養で増殖能、浸潤能、抗癌剤感受性を評価することであるが、線維芽細胞は上皮細胞の増殖・分化に影響を与える可能性があるため線維芽細胞の混入は望ましくない。現在、上皮細胞(健常粘膜、癌組織)を効率よく増殖させることのできる培地(LE培地と完全MCDB培地)に変更するとともに、初代培養で線維芽細胞混入を最小限にする方法を検討中である。またコラーゲンゲル培養法による癌細胞浸潤能試験では、まず培養条件設定のために株化した癌細胞を用いる必要があるため、現有している癌細胞の継代を続けるとともに、市販の株化癌細胞の購入、あるいは他施設からの譲渡を計画している。
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