1992 年度実績報告書

光学顕微鏡における単一蛍光分子イメージング

研究課題

研究課題/領域番号	04508002
研究機関	慶応義塾大学
研究代表者	木下一彦慶應義塾大学, 理工学部, 教授 (30124366)
研究分担者	森基シグマ光機(株), 技術部, 取締役技術部長植竹敏文 (株)オリオンレンズ設計, 代表取締役平野憲一浜松ホトニクス(株), 筑波研究所, 研究員宮田英威慶應義塾大学, 理工学部, 専任講師 (90229865)
キーワード	蛍光顕微鏡 / 迷光 / 対物レンズ / 無蛍光材料 / エバネッセント波 / レーザー
研究概要	1.無蛍光材料の選定と無蛍光対物レンズの製作無蛍光対物レンズ開発およびその他の光学部品の無蛍光化のため、種々の材料を紫外域(340nm)および可視域(500-600nm)において検定した。ガラス材料に関しては、石英をはじめとして満足できるものがみつかった。レンズ接着剤は完全無蛍光なものが見つかっていないが、ほぼ無蛍光な充填剤が見つかったのでこれを使用する予定である。表面コート剤(反射防止用)はまだよいものが見つかっておらず、さらに新しい材料の検討を続けている。コート剤はレンズ設計に基本的に影響しないので、無蛍光対物レンズの試作をはじめた。 2.単一蛍光色素分子観察のための試料の検討安定で強力な蛍光を出す点で有力候補であるテトラメチルローダミンに加え、最近開発されたBodipy系の蛍光色素をテストした。光安定性の点からはやはりローダミンが優るが、Bodipyの一つはローダミンより強力な蛍光を出す可能性があることが分かったので、検討を続ける。 3.現有の顕微鏡における迷光発生部分の同定と改善の試みニコン倒立顕微鏡を改造し、きちんとコリメートされた励起光を導入できるようにした。レーザーを使った予備実験の結果、鏡筒内の迷光をかなり減らせることが分かった。 4.エバネッセント波励起の試み低出力レーザーを用いた試験でエバネッセント波励起に成功した。しかし1分子観察にはまだ強度が足りない。高出力レーザーを用いるとともに、効率がよい集光系を組み立てて高感度化を図る予定である。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Hiroyuki HAKOZAKI,et al.,: "¨Sliding Force between a Small number of HMM Molecules and a Single Actin Filament under Optical Tweeners¨" J.Muscle Res.Cell Motility,.
[文献書誌] Takayuke NISHIZAKA,et al.,: "¨Measurement of Sliding Force Generated on an Actin Filament under Various Concentrations of HMM in an In Vitro Motile System¨" J.Muscle Res.Cell Motility,.
[文献書誌] Kazuko KIMURA,et al.,: "¨Fluorescence Quenching Measurements of the Membrane Bound Lipid Haptens with Different Length Spacers¨" Biochim.Biophys.Acta,. 1104. 9-14 (1992)
[文献書誌] Geraid MARRIOTT,et al.,: "¨Photomodulation of the Nucleatin Activity of a Photocleaveble Crosslinked Actin Dimer¨" Biochim.Intein.,. 26. 943-951 (1992)
[文献書誌] Huroyuki HYUGA,et al.,: "¨Steady-State Deformation of a Vesicle in Alternatiyg Electric Fields¨" Bioelectrochem.Beoenerg.,.
[文献書誌] Masahiro HIBTNO,et al.,: "¨Time Courses of Cell Electroporation As Revealed by Submicrosecond Imaging of Transmembrane Potential¨" Biophys.J.,.
[文献書誌] Kazuheko KINISITA,Jr.,et al.,: "″Events of Membeane Electroporation Visualized on a Time Scale from Microsecond to Secinds″" Academic Press(New York), 18 (1992)
[文献書誌] Kazuhiko KINOSITA,Jr.,et al.,: "″Orientation of Actin Monomers in Moving Actin Filaments″" Plenum(New York),

1992 年度 実績報告書

光学顕微鏡における単一蛍光分子イメージング

研究代表者

木下 一彦 慶應義塾大学, 理工学部, 教授 (30124366)

研究成果

[文献書誌] Hiroyuki HAKOZAKI,et al.,: "¨Sliding Force between a Small number of HMM Molecules and a Single Actin Filament under Optical Tweeners¨" J.Muscle Res.Cell Motility,.

[文献書誌] Takayuke NISHIZAKA,et al.,: "¨Measurement of Sliding Force Generated on an Actin Filament under Various Concentrations of HMM in an In Vitro Motile System¨" J.Muscle Res.Cell Motility,.

[文献書誌] Kazuko KIMURA,et al.,: "¨Fluorescence Quenching Measurements of the Membrane Bound Lipid Haptens with Different Length Spacers¨" Biochim.Biophys.Acta,. 1104. 9-14 (1992)

[文献書誌] Geraid MARRIOTT,et al.,: "¨Photomodulation of the Nucleatin Activity of a Photocleaveble Crosslinked Actin Dimer¨" Biochim.Intein.,. 26. 943-951 (1992)

[文献書誌] Huroyuki HYUGA,et al.,: "¨Steady-State Deformation of a Vesicle in Alternatiyg Electric Fields¨" Bioelectrochem.Beoenerg.,.

[文献書誌] Masahiro HIBTNO,et al.,: "¨Time Courses of Cell Electroporation As Revealed by Submicrosecond Imaging of Transmembrane Potential¨" Biophys.J.,.

[文献書誌] Kazuheko KINISITA,Jr.,et al.,: "″Events of Membeane Electroporation Visualized on a Time Scale from Microsecond to Secinds″" Academic Press(New York), 18 (1992)

[文献書誌] Kazuhiko KINOSITA,Jr.,et al.,: "″Orientation of Actin Monomers in Moving Actin Filaments″" Plenum(New York),

1992 年度実績報告書

木下一彦慶應義塾大学, 理工学部, 教授 (30124366)