1994 年度実績報告書

ポリオウイルス人工DI粒子RNAを利用したポリオーロタキメラウイルスワクチン開発

研究課題

研究課題/領域番号	04557025
研究機関	札幌医科大学
研究代表者	谷口孝喜札幌医科大学, 医学部助教授 (40094213)
研究分担者	相沢主税北里研究所, 生物製剤研究所, 所長 (80072362) 久下周佐東京大学, 医科学研究所, 教務職員 (50186376) 小林宣道札幌医科大学, 講師 (80186759)
キーワード	ロタウイルス / ポリオウイルス / ワクチン / VP4遺伝子 / DI粒子 / 交叉反応性中和エピトープ
研究概要	ヒトロタウイルスの複数の血清型に対し防御能を有し、腸管免疫を効果的に賦与し、そして副作用が少ないヒトロタウイルスワクチンを目指して、ポリオウイルス人工DIベクターにヒトロタウイルスVP4遺伝子の交叉反応性中和エピトープを含む抗原部位をコードする領域を挿入し、そのキメラウイルスの免疫原性を検討してきた。この過程で、いくつかの課題が生じた。交叉反応性中和エピトープを含むVP5′の抗原性から意外と低く、むしろPタイプ特異的なエピトープに富むVP8′が強い抗原性を示したことから、VP8′+VP5′を発現することとした。また、免疫沈降反応およびウエスタンブロッティング法で、発現蛋白の性状を抗VP4抗体、抗ビリオン抗体を用いて検討したが、明確には同定とすることができなかった。そこで、あらためてバキュロウイルス発現VP4(およびVP8′とVP5′)に対するより高力価の抗血清を準備するとともに、ベクターの改良を進めている。さらに、ポリオウイルスレセプター遺伝子を導入したトランスジェックマウスについては、経口感染が十分に効率的でないのでこの点についても改良を進めている。一方、VP4の中和エピトープをさらに詳細に調査すべく、各種抗VP4中和モノクローン抗体とユニークな性状を有するヒトロタウイルスおよび各種動物ロタウイルスとの反応性について検討し、ヒトロタウイルスVP4がヒト特異性を有することを明確にした。また、多数のヒトおよび動物ロタウイルス由来VP4遺伝子を解析し、ヒトと動物間のVP4遺伝子の組換えの可能性も示した。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Koki Taniguchi: "Differences in plaque size and VP4 sequence found in AS11 clones having simian authentic VP4." Virology. 198. 325-330 (1994)
[文献書誌] Koki Taniguchi: "Species specificity and interspecies relatedness in VP4 genotypes demonstrated by VP4 sequence analysis of equine,feline,and canine rotavirus strains." Virology. 200. 390-400 (1994)
[文献書誌] Nobumichi Kobayashi: "Effect of the selection pressure with anti-VP7 and anti-VP4 neutralizing monoclonal antibodies on reassortant formation between two human rotaviruses." Arch.Virol.135. 383-396 (1994)
[文献書誌] Nobumichi Kobayashi: "Genotypic diversity of reassortants between simian rotavirus SA11 and human rotaviruses having different antigenic specificities and RNA patterns." Res.Virol.145. 303-311 (1994)
[文献書誌] Huxia Wu: "Survey on the distribution of the gene 4 alleles of human rotaviruses by polymerase chain reaction." Epidemiol.Infect.112. 615-622 (1994)
[文献書誌] Michiaki Takagi: "Characterization of a G14 equine rotavirus(strain CH3)isolated in Japan" Arch.Virol.139. 209-215 (1994)

1994 年度 実績報告書

ポリオウイルス人工DI粒子RNAを利用したポリオーロタキメラウイルスワクチン開発

研究代表者

谷口 孝喜 札幌医科大学, 医学部 助教授 (40094213)

研究成果

[文献書誌] Koki Taniguchi: "Differences in plaque size and VP4 sequence found in AS11 clones having simian authentic VP4." Virology. 198. 325-330 (1994)

[文献書誌] Koki Taniguchi: "Species specificity and interspecies relatedness in VP4 genotypes demonstrated by VP4 sequence analysis of equine,feline,and canine rotavirus strains." Virology. 200. 390-400 (1994)

[文献書誌] Nobumichi Kobayashi: "Effect of the selection pressure with anti-VP7 and anti-VP4 neutralizing monoclonal antibodies on reassortant formation between two human rotaviruses." Arch.Virol.135. 383-396 (1994)

[文献書誌] Nobumichi Kobayashi: "Genotypic diversity of reassortants between simian rotavirus SA11 and human rotaviruses having different antigenic specificities and RNA patterns." Res.Virol.145. 303-311 (1994)

[文献書誌] Huxia Wu: "Survey on the distribution of the gene 4 alleles of human rotaviruses by polymerase chain reaction." Epidemiol.Infect.112. 615-622 (1994)

[文献書誌] Michiaki Takagi: "Characterization of a G14 equine rotavirus(strain CH3)isolated in Japan" Arch.Virol.139. 209-215 (1994)

1994 年度実績報告書

谷口孝喜札幌医科大学, 医学部助教授 (40094213)