| 研究概要 |
Bacillus thuringiensis(Bt)の生産する結晶様タンパク質はδ-内毒素として知られている。このδ-内毒素は無公害殺虫剤、BT剤として利用されている。このBT剤の殺虫特異性を決定する因子として中腸上皮細胞刷子縁膜(BBM)に存在するリセプターであると考えられている。そこでカイコのBBMよりBt var.aizawaiの生産するCryIA(a)に対するレセプターを抽出しその特性を明らかにすることを目的とした。
KnightらやSangdalaらはCryIA(C)に対するリセプターをタバコスズメガより抽出し、その分子量120kDaのアミノペプチターゼと65kDaのアルカリフォスファターゼであることを示した(1994)。また、Indrasithらはカイコ中腸よりBt var.kurstaki HD-1由来のCryI内毒素に対するリセプターとして220kDa,150kDa,130kDaタンパク質としている(1992)。そこで本年はCryIA(a)に対するカイコ中腸のリセプタータンパク質はアミノペプチターゼ及びアルカリフォスファターゼ活性を有するかどうかを明らかにするためリセプターの抽出過程を通してアミノベプチターゼ活性及びアルカリフォスファターゼ活製を測定した。その結果δ-内毒素との結合活性に比例してそれらの酵素は上昇し無いし、可溶化BBMVのSuperdex200によるゲル濾過パターンにおいてもδ-内毒素内毒素の結合性とアミノペプチターゼの活性ピークとは異なることが明らかとなつた。またアルカリフォスファターゼとも異なるものであつた。カイコ中腸に存在するCryIA(a)のリセプタータンパク質の分子量は180kDaと170kDaの可能性を示して来たが、抽出の過程を通して種々のプロテアーゼ混液を用いて精製すると180kDaタンパク質のみが抽出されて来ることより170kDaタンパク質は180kDaタンパク質の分解物と結論しカイコ中腸のCryIA(a)に対するリセプターは本研究で明らかにしてきている180kDaタンパク質であると結論した。
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