| 研究概要 |
酵母の新規なG2期調節遺伝子NPS1の機能解析を目的として実験を行い以下の点を明らかにした。
1.本遺伝子の推定アミノ酸配列中に存在するプロテインキナーゼのATP結合部位に点変異を導入した変異遺伝子を作製し,この部位がin vivoでの本蛋白の機能に必須な物であることを明らかにした。
2.NPS1の発現がgalactose培地中でのみ可能な条件致死株の解析により、本遺伝子がDNA複製終了の情報の確認の過程に関与していることを明らかにした。
3.本遺伝子の産物は酵母の核骨格に強固に結合して存在し、ATに富む塩基配列に親和性を持つDNA結合活性を有すること、また、この活性は本蛋白のC末端領域に存在することを明らかにした。
4.本蛋白の大量発現を目的とし、バキュロウイルス/昆虫細胞系での安定な発現方法と目的蛋白の可溶化法の確立を行なった。
5.本遺伝子の周辺で機能する細胞周期調節因子の同定を目的として、i)本遺伝子の高発現に依存して生育抑制を受ける変異株の取得、ii)NPS1欠損による致死性を遺伝子量増加によって抑圧する遺伝子の検索、iii)NPS1との同時高発現によって生育阻害をおこす遺伝子の検索を行い、現在取得された変異株、ならびに遺伝子の解析を行なっている。
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