1993 年度実績報告書

網膜ニューロンにおける細胞間連絡の細胞内情報伝達系

研究課題

研究課題/領域番号	04670083
研究機関	藤田保健衛生大学
研究代表者	宮地栄一藤田保健衛生大学, 医学部, 助教授 (90129685)
キーワード	網膜 / 水平細胞 / ギャップ・ジャンクション(ギャップ結合) / 細胞内情報伝達系 / 環状GMP / グアニル酸シクラーゼ / 一酸化窒素 / アラキドン酸
研究概要	1.カメおよびコイの網膜水平細胞にガラス管微小電極を刺入して細胞内記録を行い、電極に充填した薬物を電気泳動法により細胞内に投与しギャップ結合の開閉を電気生理学的に調べた。また蛍光色素ルシファー・イェローの細胞内注入も併用し、色素が隣接細胞へ拡散する程度を蛍光顕微鏡で観察し、形態学的確認も行った。 2.一酸化炭素(NO)の前駆体であるアルギニンの注入により色素拡散(dye-coupling)の著明な抑制が観察されたが、NO合成酵素阻害剤N^G-monomethy-L-arginineやN^G-nitro-L-arginine methyl esterをアルギニンと共に注入すると色素は隣接細胞へ拡散した。アルギニンによるギャップ結合遮断がNO合成酵素阻害剤により抑制されたことから、網膜水平細胞にNO合成酵素が存在する可能性、およびNO/環状GMP系が水平細胞間ギャップ結合を制御している可能性が強く示唆された。 3.アラキドン酸の細胞内注入により色素拡散が著明に抑制された。次にリポキシゲナーゼ阻害剤NDGAをアラキドン酸と共に注入したところ色素の隣接細胞への拡散が観察された。一方、シクロオキシゲナーゼの阻害剤indomethacinとアラキドン酸の同時注入では色素拡散は抑制された。これらの結果から、アラキドン酸によるギャップ結合遮断効果はリポキシゲナーゼ代謝系を介していることが示唆された。 4.NOあるいはアラキドン酸と共に可溶性グアニル酸シクラーゼ阻害剤methylene blueやcystamineの水平細胞内注入を行ったところ、水平細胞の入力抵抗増大は全く観察されず、また隣接細胞への色素拡散が観察され、NOやアラキドン酸によるギャップ結合の遮断が、グアニル酸シクラーゼの活性化そして水平細胞内環状GMP濃度の上昇によって生じることが明らかになった。

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Miyachi,E.-I.: "Regulation of electrical coupling between horizontal cells by nitric oxide." Japanese Journal of Physiology. 43. S32 (1993)
[文献書誌] Miyachi,E.-I.: "Modulation of gap junctions by arachidonic acid and its metabolites in retinal horizontal cells." Japanese Journal of Physiology. 43. S201 (1993)
[文献書誌] 三輪正人: "ラット気管平滑筋細胞のgap junctionに対するnitroprussideの効果." アレルギー. 42. 1633-1636 (1993)
[文献書誌] Ei-ichi Miyachi: "Effect of a guanylate cyclase inhibitor on gap junctions in retinal horizontal cells." Neuroscience Research. S18. S177 (1993)
[文献書誌] Ei-ichi Miyachi: "Arachidonic acid blocks gap junctions between retinal horizontal cells." Neuro Report. (印刷中).
[文献書誌] Ei-ichi Miyachi: "Blocking effect of L-arginine on retinal gap junctions by activating guanylate cyclase via generation of nitric oxide." Biogenic Amines. (印刷中).
[文献書誌] Motohiko Murakami: "Progress in Retinal and Eye Research" Pergamon Press,Oxford and New York,(印刷中),
[文献書誌] 村上元彦: "新医科学大系第7巻刺激の受容と生体制御分担執筆:視覚-光と色の受容" 中山書店,(印刷中),

1993 年度 実績報告書

網膜ニューロンにおける細胞間連絡の細胞内情報伝達系

研究代表者

宮地 栄一 藤田保健衛生大学, 医学部, 助教授 (90129685)

研究成果

[文献書誌] Miyachi,E.-I.: "Regulation of electrical coupling between horizontal cells by nitric oxide." Japanese Journal of Physiology. 43. S32 (1993)

[文献書誌] Miyachi,E.-I.: "Modulation of gap junctions by arachidonic acid and its metabolites in retinal horizontal cells." Japanese Journal of Physiology. 43. S201 (1993)

[文献書誌] 三輪正人: "ラット気管平滑筋細胞のgap junctionに対するnitroprussideの効果." アレルギー. 42. 1633-1636 (1993)

[文献書誌] Ei-ichi Miyachi: "Effect of a guanylate cyclase inhibitor on gap junctions in retinal horizontal cells." Neuroscience Research. S18. S177 (1993)

[文献書誌] Ei-ichi Miyachi: "Arachidonic acid blocks gap junctions between retinal horizontal cells." Neuro Report. (印刷中).

[文献書誌] Ei-ichi Miyachi: "Blocking effect of L-arginine on retinal gap junctions by activating guanylate cyclase via generation of nitric oxide." Biogenic Amines. (印刷中).

[文献書誌] Motohiko Murakami: "Progress in Retinal and Eye Research" Pergamon Press,Oxford and New York,(印刷中),

[文献書誌] 村上元彦: "新医科学大系 第7巻 刺激の受容と生体制御分担執筆:視覚-光と色の受容" 中山書店,(印刷中),

1993 年度実績報告書

宮地栄一藤田保健衛生大学, 医学部, 助教授 (90129685)

[文献書誌] 村上元彦: "新医科学大系第7巻刺激の受容と生体制御分担執筆:視覚-光と色の受容" 中山書店,(印刷中),