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1993 年度 研究成果報告書概要

細胞膜タンパク質,シスチン・グルタミン酸交換輸送担体の構造・機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 04670136
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 医化学一般
研究機関筑波大学

研究代表者

石井 哲郎  筑波大学, 基礎医学系, 助教授 (20111370)

研究分担者 坂内 四郎  筑波大学, 基礎医学系, 教授 (70019579)
研究期間 (年度) 1992 – 1993
キーワードシスチン / ストレスタンパク質 / アミノ酸輸送 / cDNA / マクロファージ
研究概要

マクロファージmRNAの1、5-3kb長の画分を用いて、方向性を持ったcDNAライブラリーを作製した。まず、ストレス剤で誘導されるクローンを、約20000ファージプラークの中より、126個選別した。これらの誘導クローンを相互ハイブリで分類し、塩基配列の一部を解析した。その結果、ヘムオキシゲナーゼ、CD36、MSP23に加えて新たに、IL1リセプターアンタゴニスト前駆体、IFN-γ誘導タンパク204をコードするクローンが得られた。後2種のクローンについては、単に「培養刺激」によって誘導されるものと予想された。さらに、ストレス刺激剤で誘導されるものとして、メタロエラスターゼと、未知のタンパクをコードするA170クローン群が得られた。クローンA170については、cDNAの全塩基配列を決定したところ、39kDaのタンパクをコードしていると予想されたが卵母細胞でシスチン輸送活性の発現は、見られなかった。以上の結果を踏まえ、シスチンキャリアーのクローンをさらに検索するために、上記主要5種以外のクローンを約700選別した。この700クローンをまとめて活性発現のアッセイを行ったが、卵母細胞にシスチン輸送活性の発現は見られなかった。
以上のごとく、本プロジェクト期間内には当初目標としていたcDNAクローンの単離には至らなかった。しかしながら、本プロジェクトの研究過程で新しいストレスタンパク質ファミリーの一員であるMSP23のクローニングに成功したことと、CD36とメタロエラスターゼがストレス剤によって誘導されること(未発表)を明らかにした。さらに、クローンA170等、未知の数種類のストレス誘導クローンが得られた。

  • 研究成果

    (15件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (15件)

  • [文献書誌] Ishii,T.: "Cloning and characterization of a 23-kDa stress-induced mouse peritoneal macrophage protein." J.Biol.Chem.268. 18633-18636 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Saito,H.: "Expression of human intestinal dipeptide transporter in Xenopus laevis oocytes." Biochem.Pharmacol.45. 776-779 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Sato,H.: "Induction of a 23-kDa stress protein by oxidative and sulfhydryl-reactive agents in mouse peritoneal macrophages." Biochim.Biophys.Acta. 1148. 127-132 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Sato,H.: "Stress proteins in macrophages." Therapeutic Res.13. 47-49 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Miura,K.: "Cystine uptake and glutathione level in endotherial cells exposed to oxidative stress." Am.J.Physiol.262. C50-C58 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Ishii,T.: "Induction of cystine transport activity by stress." Ann.NY.Acad.Sci.663. 497-498 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Ishii, T., Nakayama, K., Sato, H., Miura, K., Yamada, M., Matsue, M., Sugita, Y., and Bannai, S: "Expression of mouse cystine transpoter in Xenopus oocyte." In frontiers and new horizons in amino acid research.(Takai, K., e d.). 447-450 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Tateishi, N., Sato, H., Ishii, T., and Bannai, S.: "Glutamate and cystine transport for maintenance of intracellular GSH level." In frontiers and new horizons in amino acid research.(Takai, K., ed.). 443-446 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Ishii, T.: "Progress in the study of amino acid transport in animal plasma membrane." Membrane. 17. 135-141 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Ishii, T., Sato, H., Miura, K., Sagara, J., and Bsannai, S.: "Induction of cystine transport activity by stress." Ann.NY.Acad.Sci.663. 497-498 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Miura, K., Ishii, T., Sugita, Y., and Bannai, S.: "Cystine uptake and glutathione level in endotherial cells exposed to oxidative atress." Am.J.Physiol.262. C50-C58 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Sato, H., Ishii, T., Yamada, M., and Bannai, S.: "Stress proteins in macrophages." Therapeutic Res.13. 47-49 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Sato, H., Ishii, T., Sugita, Y., Tateishi, N., and Bannai, S.: "Induction of a 23-kDa stress protein by oxidative and sulfhydryl-reactive agents in mouse peritoneal macrophages." Biochem.Biophys.Acta. 1148. 127-132 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Saito, H., Ishii, T., and Inui, K.: "Expression of human intestinal dipeptide transporter in Xenopus laevis oocytes." Biochem.Pharmacol.45. 776-779 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Ishii, T., Yamada, M., Sato, H., Matsue, M., Taketani, S., Nakayama, K., Sugita, Y., and Bannai, S.: "Cloning and characterization of a 23-kDa stress-induced mouse peritoneal macrophage protein." J.Biol.Chem.268. 18633-18636 (1993)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より

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公開日: 1995-03-27  

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