発癌の初期段階に於ける遺伝子発現制御

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04670156
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 酒井 正春 北海道大学, 医学部, 助教授 (50162269)
• キーワード: GST-P / Jun / Maf / ペルオキシソーム増殖剤 / クロフィブレート / ペルオキシソーム増殖剤受容体 / 転写制御 / ラット肝化学発癌

研究概要

グラタチオントランスフェラーゼP(GST-P)はほとんどのラット肝化学発癌過程の初期から特異的に発現する。GST-Pの発現制御機構を詳しく検討し以下の点が新しく明らかとなった。GPEIと名付けたエンハンサーエレメント、さらに-65の位置に存在するTREに最近解析が進んでいるmaf癌遺伝子の産物が結合し、転写を強く促進することが分かった。Mafの発癌過程でのGST-P発現との関わりを現在検討している。GST-Pがペルオキシソーム増殖剤などで誘発された肝癌では発現しないこと、さらにDENなどで誘発された前癌病変での強いGST-Pの発現がペルオキシソーム増殖剤の投与で著しく減少することからペルオキシソーム増殖剤が何らかの機序でGST-Pの発現を抑制している可能性が考えられる。そこで、ペルオキシソーム増殖剤およびペルオキシソーム増殖剤受容体(PPAR)がGST-P遺伝子の発現にどのように関与するか調べた。ペルオキシソーム増殖剤受容体(PPAR)cDNAをラット肝からクローンし細胞に導入した結果、GST-P遺伝子の発現はペルオキシソーム増殖剤、クロフィブレートに依存して抑さえられた。このGST-P遺伝子の発現抑制はGST-P遺伝子の-65付近に存在するTRE配列に依存しており、ここに結合して転写を促進する転写因子、Jun又はMafが関係していると考えられた。ペルオキシソームによる転写抑制がどちらの転写因子を抑制することによるのかを調べるためそれぞれの遺伝子を細胞に導入し、これらの転写促進活性に及ぼすPPAR、およびペルオキシソーム増殖剤の影響を調べた。その結果、Junの転写促進活性がPPARおよびクロフィブレートによって特異的に抑制されることが分かった。逆にPPARの転写促進活性もJunによって抑制されることから、これらはお互いに相互作用し、お互いの活性を抑制していることが分かった。

研究成果

• [文献書誌] Nishihira,J.: "Identification of the fatty acid binding site on glutathione S-transferase P by immobilization to fatty" Biochem.Biophys.Res.Commun.190. 823-831 (1993)
• [文献書誌] Yamashita,T.: "High level expression of human alpha-fetoprotein in transgenic mice" Biochem.Biophys.Res.Commun.191. 715-720 (1993)
• [文献書誌] Miyagishima,T.: "Expression,purification and binding to the receptor of human insulin-like growth factor II." Biochem.Biophys.Act.1203. 155-161 (1993)
• [文献書誌] Nishihira,J.: "Identification of ionizable groups essential for the enzyme catalysis of glutathione S-transferase P." Biochem.Biophys.Res.Commun.194. 1466-1474 (1993)
• [文献書誌] Nishihira,J.: "The fatty acid binding site of human alpha-fetoprotein." Biochem.Biophys.Res.Commun.196. 1049-1057 (1993)
• [文献書誌] Nishihira,J.: "Purification and characterization of human macrophage migration inhibitory factor:Evidence for specific" Biochem.Mol.Biol.Internat.31. 841-850 (1993)