| 研究課題/領域番号 |
04670158
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
病態医化学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
和泉 孝志 東京大学, 医学部(医), 助手 (70232361)
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| 研究分担者 |
本田 善一郎 東京大学, 保健センター, 助手 (70238814)
清水 孝雄 東京大学, 医学部(医), 教授 (80127092)
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| 研究期間 (年度) |
1992 – 1993
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| キーワード | 生理活性脂質 / ロイコトリエン / 血小板活性化因子 / 生合成酵素 / 受容体 / 情報伝達 / 不活性化酵素 |
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| 研究概要 |
1.ロイコトリエン(LT)生合成ならびに分解酵素の精製および性質についての研究
LTC_4合成酵素の部分精製標品を用いて、モノクローナル抗体を作製し、この抗体を用いた酵素精製を試みている。
LTA_4水解酵素の変異体を作製することにより、LTB_4生成酵素活性とアミノペプチダーゼ活性の2つを分離し、この2つの酵素活性の活性中心が異なることを明らかにした。
腎臓におけるLTB_4分解経路が12-ヒドロキシ脱水素反応によって始まることを明らかにし、さらに本酵素の精製に成功した。
2.ロイコトリエンの作用機序に関する研究
アフリカツメガエルの卵母細胞を用いた電気生理学的な方法によってLTB_4の受容体のcDNAクローニングを、また哺乳動物培養細胞および放射標識リガンドを用いた発現クローニングによってLTD_4の受容体のcDNAクローニングを試みている。
3.PAF受容体に関する研究
ラット脳に機能的なPAF受容体が存在することを明らかにした。
好酸球性白血病細胞(EoL-1)の分化誘導に伴うPAF受容体の誘導を明らかにした。
ヒトPAF受容体のゲノムを解析することにより、異なった2種類のプロモーターによって白血球タイプと心筋タイプの2つのPAF受容体mRNAが転写されてくることを明らかにし、現在そのプロモーター活性の検索を進めている。
COS細胞に発現させたモルモットPAF受容体を介する情報伝達経路を解析し、MAPキナーゼ系の関与を明らかにし、1つの受容体蛋白が複数のG蛋白質を介して細胞内に情報を伝えることを明らかにした。
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