1992 年度実績報告書

レチノイン酸合成酵素であるシトクロムP-450モノオキシゲナーゼ系の研究

研究課題

研究課題/領域番号	04670164
研究機関	香川医科大学
研究代表者	市川佳幸香川医科大学, 医学部, 教授 (60028355)
研究分担者	三浦成敏香川医科大学, 医学部, 助手 (70190585) 松尾義則香川医科大学, 医学部, 助手 (80219401)
キーワード	シトクロムP-450 / レチノイン酸 / モノオキシゲナーゼ / 酸化還元酵素 / ヘム酵素 / 膜蛋白質 / ビタミンA / 脂溶性ビタミン
研究概要	レチノイドの高等動物の肝臓における代謝酵素はこれまでアルコール脱水素酵素、アルデビド脱水素酵素、アルデビド酵化素並びにキサンチン脱水素酵素等の報告があるが、レチナールから形成されるレチノイン酸はミクロソームのシトクロムP-450依存性モノオキシゲナーゼ系によることを証明した。その根拠はCOによる阻害と光照射による酵素活性の回復、しかも作用スペクトルの吸収極大値が450nmにあること、シトクロムP-450依存性モノオキシゲナーゼ系による分子状^<18>O_2レチノイシ酸への導入実験、及びH_2^<18>Oの^<18>Oはレチノイン酸に添加されないこと、またNADPH-シトクロムP-450還元酵素坑体による阻害等による実験結果に基づいてである。我々は更に生理活性物質として注目されているレチノイン酸の合成酵素(シトクロムP-450_<RA>)の酵素化学的特性を確立するための研究を行なった。肝ミクロソームには約50種のシトクロムP-450のアイソザイムが局在するが、ミクロソームにおけるレチノイン酸生合成がシトクロムP-450アイソザイムのどのP-450アイソザイムによるかを予測するために各種シトクロムP-450誘導剤の影響を調べた。即ちフェノバルビタール、アルコール、β-ナフトフラボン、3-メチルコランスレン並びにクロトリオール等を使用した。フェノバルビタールよりレチノイン酸合成活性が誘導され、アクチノマイシン Dにより阻害された。その結果、シトクロムP-450アイソザイムはII型のファミリーであると思われた。現在、フェノバルビタール誘導ウサギ肝ミクロソームよりレチノイン酸合成酵素(シトクロムP-450)の精製を進めている。

研究成果

(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Hori, H.: "Electronic and stereochemical characterizations of intermediates in the photolysis of ferric cytochrome P-450scc nitrosyl complexes." J. Biol. Chem.267. 18377-18381 (1992)
[文献書誌] Tsubaki, M.: "Effects of cholesterol side-chain groups and adrenodoxin binding on the vibrational modes of carbon monoxide bound to cytochrome P-450_<scc>: Implications of the productive and the nonproductive substrate bindings." Biochemistry. 31. 8991-8999 (1992)
[文献書誌] Iwamoto, Y.: "Absorbance spectral change of the cytochrome P-450_<s21>- phenylisocyanide complex upon binding of reduced NADPH- cytochrome P-450 reductase." Biochim. Biophys. Acta. 1159. 122-128 (1992)
[文献書誌] Tsuneoka, Y.: "Characterization of the cytochrome P-450 IID subfamily in bovine liver: Nucleotide sequences and microheterogeneity." Eur. J. Biochem.208. 739-746 (1992)
[文献書誌] Matsuo, Y.: "Expression cloning of a sheep adreno-ferredoxin using the polymerase chain reaction." FEBS lett. 301. 132-136 (1992)
[文献書誌] Kurokohchi, K.: "Inhibition mechanism of reconstituted cytochrome P-450_<scc>- linked monooxygenase system by antimycotic reagents and other inhibitors." J. Steroid Biochem. Molec. Biol.42. 287-292 (1992)
[文献書誌] 市川佳幸: "新生化学実験講座第9巻ホルモンII 非ペプチドホルモン" (株)東京化学同人, 536 (1992)

1992 年度 実績報告書

レチノイン酸合成酵素であるシトクロムP-450モノオキシゲナーゼ系の研究

研究代表者

市川 佳幸 香川医科大学, 医学部, 教授 (60028355)

研究成果

[文献書誌] Hori, H.: "Electronic and stereochemical characterizations of intermediates in the photolysis of ferric cytochrome P-450scc nitrosyl complexes." J. Biol. Chem.267. 18377-18381 (1992)

[文献書誌] Tsubaki, M.: "Effects of cholesterol side-chain groups and adrenodoxin binding on the vibrational modes of carbon monoxide bound to cytochrome P-450_<scc>: Implications of the productive and the nonproductive substrate bindings." Biochemistry. 31. 8991-8999 (1992)

[文献書誌] Iwamoto, Y.: "Absorbance spectral change of the cytochrome P-450_<s21>- phenylisocyanide complex upon binding of reduced NADPH- cytochrome P-450 reductase." Biochim. Biophys. Acta. 1159. 122-128 (1992)

[文献書誌] Tsuneoka, Y.: "Characterization of the cytochrome P-450 IID subfamily in bovine liver: Nucleotide sequences and microheterogeneity." Eur. J. Biochem.208. 739-746 (1992)

[文献書誌] Matsuo, Y.: "Expression cloning of a sheep adreno-ferredoxin using the polymerase chain reaction." FEBS lett. 301. 132-136 (1992)

[文献書誌] Kurokohchi, K.: "Inhibition mechanism of reconstituted cytochrome P-450_<scc>- linked monooxygenase system by antimycotic reagents and other inhibitors." J. Steroid Biochem. Molec. Biol.42. 287-292 (1992)

[文献書誌] 市川 佳幸: "新生化学実験講座 第9巻 ホルモンII 非ペプチドホルモン" (株)東京化学同人, 536 (1992)

1992 年度実績報告書

市川佳幸香川医科大学, 医学部, 教授 (60028355)

[文献書誌] 市川佳幸: "新生化学実験講座第9巻ホルモンII 非ペプチドホルモン" (株)東京化学同人, 536 (1992)