研究課題/領域番号 |
04670173
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研究機関 | 東北大学 |
研究代表者 |
増田 高行 東北大学, 医学部・病理, 助教授 (00113910)
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研究分担者 |
石井 元康 東北大学, 医学部・第三内科, 助手 (30159678)
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キーワード | ウィルス性肝炎 / Double negative T cell / 自己免疫 / T cell receptor / 免疫組織化学法 |
研究概要 |
我々のこれまでの研究の結果、肝臓類洞に添ってγδ-Tリンパ球などの各種リンパ球が内皮細胞に密着し存在し肝臓における免疫監視機構を担っているものと考えられる。これまでにもCD8陽性リンパ球などの重要性が指摘されてきたが、我々は自己免疫マウスにおいて肝臓のdouble negative cellが増加していることが共通の現象であることを見いだし、ウイルス性肝炎においてもDN-T cellが存在し、自己免疫が関与しているものと推測した。piecemeal necrosis部位では多くの場合明らかな病原体が証明されず、多数のリンパ球が認められることより肝細胞に対する異常なT細胞禁止クローンが重要な病態となっているものと考えられる。残念ながら現在までに、自己免疫マウスのVβ8の様な特定のレセプター遺伝子の異常は確認されていない。piecemeal necrosisが本当に自己免疫に関与しているものならばdouble negative T cellを中心とした禁止クローンの異常リンパ球の出現が予測される。これら特定のTリンパ球レパトアの存在の有無を検討を試みた。そこでウイルス性肝炎を示す臨床症例のリンパ球のVβ遺伝子の利用状況を新鮮な肝臓生検材料を用いてノーザンブロッティング法で検討する予定であったが、mRNAを抽出するに十分な余分の肝生検を実施することが中々できずやむを得ず免疫組織化学法とin situ hybridization法を中心に検索することに方針に変更せざるを得なかった。piecemeal necrosisの期待される適当な可燃症例を採取の血直ちにPLP固定液にて固定し、凍結切片とし免疫組織化学法を用いてT細胞レセプターを検索すべく材料を集めている。免疫染色の抗体としてはαβTCRスクリーニングパネルの各種モノクローナル抗体群を用いて検討し始めている。しかし、本抗体はFACS用の抗体であり中々免疫染色により十分な染色結果が得られず、免疫染色条件設定に苦労している。
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