| 研究課題/領域番号 |
04670235
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| 研究機関 | 慶応義塾大学 |
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研究代表者 |
田邊 將信 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (80051928)
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| 研究分担者 |
藤本 啓二 慶應義塾大学, 理工学部, 助手 (70229045)
金子 信明 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50177523)
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| キーワード | マンソン住血吸虫 / 肝線維化 / コラーゲン合成 / コラーゲン特異的mRNA / 合成アニオニックポリマー / 無細胞蛋白合成 / 肝実質細胞 / 線維芽細胞 |
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| 研究概要 |
1.本年度はアクリル酸ホモポリマー(HOMO‐AP)以外にアクリル酸とイソブチルビニルエーテルとのコポリマー、あるいは3種類の天然多糖にカルボキシル基を導入したポリマーの薬理活性を検討した。マンソン住血吸虫感染後1週〜5週の間のいずれかの時期にHOMO‐APを感染マウス静脈内に投与した場合、肝脾湿重量、肝内コラーゲン量や核酸量に有意な増加が観察され、虫卵性肉芽腫の大きさにも有意な増加が見いだされた。しかし、他の4種類のポリマー投与群ではこの様な変化は観察されなかった。一方、感染前投与では、HOMO‐AP投与群では回収成虫数の有意な低下がみられたが、他のポリマー投与群ではこの様な変化は観察されなかった。
2.コラーゲンType Iに対する特異抗体を用いて、翻訳可能なalpha_1(I)及びalpha_2(I)コラーゲンmRNAレベルの測定を行った。感染マウスから分離したtotal RNAを用いた場合、35S‐methionineのalpha_1(I)及びalpha_2(I)コラーゲン分子への取り込みは非感染マウスに比較して6‐10倍高いことが明かとなった。しかし、測定毎の変動が大きく、total RNAの分離法を含め測定条件の改良が必要となった。測定条件が確立された段階で他のコラーゲン分子のmRNAレベルについても測定を行う。
3.感染マウスの抽出液に含まれる線維化促進因子は正常マウス肝臓、あるいは初代培養線維芽細胞及び肝実質細胞のコラーゲン合成を促進することが明かとなったので、初代培養線維芽細胞及び肝実質細胞を標的細胞とした活性測定法を用いて、肝抽出液からの本因子の精製を試みた。ゲル濾過法による分離精製は可能であったが、イオン交換クロマト法及び他の方法で精製を進めると活性消失が見られたので、従来使っていない方法を用いて完全な精製をめざす。
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