インフルエンザウイルス非構成蛋白(NS2)によるゲノムRNA複製の調節

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04670279
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 小田切 孝人 自治医科大学, 医学部, 講師 (80177237)
• 研究分担者: 田中 利典 自治医科大学, 医学部, 講師 (30146154) ; 田代 真人 自治医科大学, 医学部, 助教授 (90111343)
• キーワード: インフルエンザウイルスA / 非構成蛋白NS2 / RNAの転写の複製 / 干渉性欠損ウイルス / RNAポリメラーゼ

研究概要

インフルエンザウイルスの非構成蛋白NS2の機能は、全く不明である。我々は、NS2蛋白の機能解析を目的として作製したNS2変異株の分離に成功した。この変異株はNS2蛋白の機能異常によって、PA遺伝子を欠損した干渉性欠損(D1)ウイルスを産生する。本研究ではNS2変異株を用いて、ウイルスゲノムRNAの複製過程におけるNS2蛋白の機能を解明することを目的として実験を行い、以下の点を明らかにした。
1.NS2蛋白はゲノム複製の鋳型となるcRNA合成過程で、ゲノムRNAの一部を欠落したD1-RNAの増幅を抑制し、正常ゲノムRNAが優先的に複製されるように調節する機能を持つ。
2.NS2蛋白は感染初期において、ゲノムRNAの初期転写からゲノム複製の第1段階であるcRNA合成過程へのスイッチングの時期を調節する。
NS2蛋白はウイルス粒子形成過程において、ゲノムRNA分節間の分子識別に関与している可能性が示唆された。これによって、8本のゲノムRNAが重複しないように、またどれもが欠失しないように選択的にパッケージングされることが明らかになった。
我々は現在、reverse geneticsの手法を駆使してNS2蛋白によるRNA分節の識別を規定しているゲノムRNA上のシグナルの同定を行っている。

研究成果

• [文献書誌] Takato Odagiri: "An amino acid change in the NS2 protein of influenza A virus mutant causes generation of defective interfering(DI) particles by amplirying DI RNAs and" J.Gen.Virol.75. 43-53 (1994)
• [文献書誌] Takato Odagiri: "Reversed misreading of a GC doublet by the modified T7 DNA polymerase,Sequenase." Virus Genes. (in press ). (1994)
• [文献書誌] Masashi Urabe: "Persistence of viral genes in a variant of MDCK cell after productive replica-tion of a mutant of influenza virus A/WSN." Arch,Virol.128. 97-110 (1993)
• [文献書誌] Takato Odagiri: "Structure and function of the influenza virus genome." Protein,Nuleic Acid,Enzyme. 37. 96-102 (1992)
• [文献書誌] Takato Odagiri: "Synthesis of the NS2 nonstructural protein messenger RNA of intluenza A viruses occurs in the absence of viral proteinsynthesis." Arch.Virol.120. 281-228 (1991)
• [文献書誌] Taato Odagiri: "Strucuture and functions of the NS gene of influenza viruses." Med.Rev.36. 77-106 (1991)