1992 年度実績報告書

HIVのエンベロープ構造と機能

研究課題

研究課題/領域番号	04670282
研究機関	大阪医科大学
研究代表者	後藤俊幸大阪医科大学, 医学部, 講師 (30121651)
研究分担者	森田智津子大阪医科大学, 医学部, 助手 (50131355)
キーワード	AIDS / 極低温高分解能電子顕微鏡 / 免疫電子顕微鏡法 / HIV-1 / エンベロープ / ウイルス / モノクローナル抗体 / フリーズフラクチア
研究概要	HIVが細胞へ侵入・感染する機序を知る目的で、HIVのエンベロープ構造と機能について検討した。 1. HIVウイルス粒子のエンベロープ構造濃縮精製したHIV粒子をアルデヒド固定後分散させ、無染色のまま氷包埋法により極低温高分解能電子顕微鏡で直接観察した。HIVのエンベロープ構造は、2重膜とその膜に一部埋まった突起様構造からなり、突起様構造は直径4.8nmの球形の“knob"と長さ3.2nmの柄からなっていることが明瞭に観察された。また、2重膜内の膜内粒子はフリーズフラクチア法により観察され、球状をしていた。 2. エンベロープの反応性ウイルス粒子に抗HIV-1モノクローナル抗体やConAなどのレクチンを反応させ、金標識して電子顕微鏡観察すると、抗gag抗体(抗p18、抗p24抗体)では反応はみられなかったが、抗env抗体(抗gp120/gp160抗体)はエンベロープに反応し、また、レクチンも同様に反応し糖鎖の存在も確認した。しかし、その反応量は極低温電顕で観察された突起様構造の数よりも極端に少なく、通常の免疫反応では突起様構造数個に1個の抗体やレクチンが反応するのであろうと考えた。 3.エンベロープと細胞の結合ウイルス粒子を細胞に感染されると、数分以内に細胞内に侵入する。この侵入の瞬間にはエンベロープと細胞膜との間にそれぞれ単独よりも太い連結物が観察され、おそらく突起構造と、細胞のレセプターとの結合物と考えられた。さらにその結合状態の微細構造を検討中している。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] GOTO, Toshiyuki: "Projection structures of HIV-1 observed with high resolution electron cryo-microscopy" Electron Microscopy. 2. 162-163 (1992)
[文献書誌] KISHI, Masahiko: "Surviving infection by human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1):the vif or vpu mutant generates cells producing noninfectious or markedly reduced cytopathic HIV-1 particles" J. Gen. Virology. 73. 77-87 (1992)
[文献書誌] FUKUI,Takeshi: "Inner architecture of human and simian immunodeficiency viruses" Microscopy Research and Technique(in press). (1993)
[文献書誌] MORITA, Chizuko: "Immuno-electron microscopic studies on HIV-1 gag antigens expressed on the surface and in the cytoplasm of infected cells" Electron Microscopy. 2. 292-293 (1992)
[文献書誌] MORITA, Chizuko (Aloia,R.C. and Curtain,C.C. ed.): "Advance in Membrane Fluidity series vol.6 “Membrane Interaction of HIV--Implications for pathogenesis and therapy in AIDS"" Wiley-Liss, Inc., 433 (1992)
[文献書誌] 中井益代 (日本電子顕微鏡学会編): "電子顕微鏡学" 学際企画, 585 (1992)

1992 年度 実績報告書

HIVのエンベロープ構造と機能

研究代表者

後藤 俊幸 大阪医科大学, 医学部, 講師 (30121651)

研究成果

[文献書誌] GOTO, Toshiyuki: "Projection structures of HIV-1 observed with high resolution electron cryo-microscopy" Electron Microscopy. 2. 162-163 (1992)

[文献書誌] KISHI, Masahiko: "Surviving infection by human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1):the vif or vpu mutant generates cells producing noninfectious or markedly reduced cytopathic HIV-1 particles" J. Gen. Virology. 73. 77-87 (1992)

[文献書誌] FUKUI,Takeshi: "Inner architecture of human and simian immunodeficiency viruses" Microscopy Research and Technique(in press). (1993)

[文献書誌] MORITA, Chizuko: "Immuno-electron microscopic studies on HIV-1 gag antigens expressed on the surface and in the cytoplasm of infected cells" Electron Microscopy. 2. 292-293 (1992)

[文献書誌] MORITA, Chizuko (Aloia,R.C. and Curtain,C.C. ed.): "Advance in Membrane Fluidity series vol.6 “Membrane Interaction of HIV--Implications for pathogenesis and therapy in AIDS"" Wiley-Liss, Inc., 433 (1992)

[文献書誌] 中井 益代 (日本電子顕微鏡学会編): "電子顕微鏡学" 学際企画, 585 (1992)

1992 年度実績報告書

後藤俊幸大阪医科大学, 医学部, 講師 (30121651)

[文献書誌] 中井益代 (日本電子顕微鏡学会編): "電子顕微鏡学" 学際企画, 585 (1992)