| 研究概要 |
Herpes simplex virus (HSV) 神経感染症においては、脳炎はHSV1型、脊髄炎・髄膜炎は2型によるとされる。従来、これらの診断は主として髄液〓体価の検索から確定されているにすぎない。とくに、compromised hostや小児例などでの HSV1,2型の区別は明瞭ではない。最近、導入されたpolymerase chain reaction(PCR)による髄液からの HSV DNA 検査は陽性率のたかいことが注目されている。さらに、本研究では HSV1,2型共通 DNA 片を増幅させ、1,2型のプローベを用いて、hybridization させ型同定を行う。HSV 脳炎・髄膜炎など神経系感染症における1,2型の役割を明らかにする。
1.HSV神経感染症の13症例・髄液検索、経時的に髄液を-80℃に保存。
2.PCR 増幅 DNA 片の峻厳ハイブンダイゼーションによる HSV型同定プライマーの設定:外被糖蛋白をコードする遺伝子で、1,2型で共通の配列部分を送択したCU_L44領域、両プライマーでは約30%の塩基が異なる)。増幅DNA片は約800bp長、ハイブリタイガーション:マイクロプレートを使う方法(Inouye & Hondo,J.Clin.Microbiol.28:1469,1990 で,62℃+50%ホルムアルデヒドの峻厳条件下で実施。1,2型プローグは、各標準株を用い、ビオチン-αUTPをPCRで取り組み込ませて作製した。
10例から検出された。HSV 1型6例と2型4例同定された。1脳幹脳炎例と2髄膜炎例ではHSV 1型であった。逆に、急性成人型脳炎1例においてHSV 2型が同定された。さらに、症例数を増やして検討する。
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