象牙質石灰化にともなうリンタンパク質とコラーゲンとの結合形成

1993 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 04671118
• 研究種目: 一般研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 機能系基礎歯科学
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 藤沢 隆一 北海道大学, 歯学部, 助手 (40190029)
• 研究期間 (年度): 1992 – 1993
• キーワード: フォスフォフォリン / リンタンパク質 / 象牙質 / コラーゲン / 石灰化 / 架橋結合

研究概要

1.フォスフォフォリンとコラーゲンとの静電的親和性
象牙質に特有のリンタンパク質であるフォスフォフォリンとコラーゲンとの試験管内での結合実験をおこなった.フォスフォフォリンはコラーゲン分子に対して有意の親和性を示した.高イオン強度では結合が阻害されるのでこの結合は静電的親和性によると考えられる.コラーゲンのCNBrペプチドを基質として結合実験をおこなったところ、フォスフォフォリンはα1CB6ペプチドに選択的親和性を示した.このペプチドはコラーゲン分子のC末端付近に相当する.
2.フォスフォフォリン-コラーゲン結合物の分析
フォスフォフォリン分子の一部は基質中に分秘された後、基質コラーゲンと強固に結合することが知られている.不溶性コラーゲンを分解可溶化することによってこのフォスフォフォリン-コラーゲン結合物を可溶化することができる.得られた結合物は多様な成分の混合物ではあるが、平均して残基数比でフォスフォフォリンとコラーゲンが3:2で結合したものであると考えられる.両者の間の結合は共有結合性の架橋である可能性が高い.抗α1CB6抗体による分析、およびペプチドのアミノ酸配列分析から、フォスフォフォリンはα1CB6ペプチドに結合していることが判明した.
3.試験管内でのフォスフォフォリンとコラーゲンとの架橋形成
生体内でおこるフォスフォフォリンとコラーゲンの架橋形成のモデル実験として両タンパク質を試験管内でインキュベートした.インキュベーション時間の経過とともに両タンパク質は強固に結合されていくことが観察された.架橋形成のpH依存性および阻害実験から、この架橋はフォスフォセリンのβ脱離反応によって形成されるリジノアラニン架橋である可能性が示唆された.

研究成果

• [文献書誌] Fujisawa,R.et al.: "Affinity of bone sialoprotein and several other bone and dentin acidic proteins to collagen fibrils" Calcified Tissue International. 51. 438-442 (1992)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Zhou,H.Y.et al.: "Effects of a bone lysine-rich 18K protein on osteo-blast-like MC3T3 E1 cells." Biochemical Biophysical Research Communication. 186. 1288-1293 (1992)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Fujisawa,R.et al.: "Differences in composition of cell-attachment sialo-proteins between dentin and bone." Journal of Dental Research. 72. 1222-1226 (1993)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Wada,Y.et al.: "A simple method to survey proteins which affect in vitro mineralization." Japanese Journal of oral Biology. 35. 439-442 (1993)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Fujisawa,R.et al.: "Proteolytic analysis of dentin and bone acidic proteins adsorbed on hydroxyapatite crystals." Bulletin de l'Institute oceanographique,Monaco. (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Fujisawa,R.et al.: "In vitro and in vivo association of dentin phospho-phoryn with alpha1CB6 peptide of type I collagen." Connective Tissue Research. (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Fujisawa, R.and Kuboki, Y.: "Affinity of bone sialoprotein and several other bone and dentin acidic proteins to collagen fibrils." Calcified Tissue International. 51-4. 438-442 (1992)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Zhou, H-Y., Ohnuma, Y., Takita, H., Fujisawa, R., Mizuno, M.and Kuboki, Y.: "Effects of a bone lysine-rich 18K protein on osteoblast-like MC3T3 E1 cells." Biochemical Biophysical Research Communication. 186-13. 1288-1293 (1992)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Fujisawa, R., Butler, W.T., Brunn, J.C., Zhou, H.Y.and Kyboki, Y.: "Differences in composition of cell-attachement sialoproteins between dentin and bone." Journal of Dental Research. 72-12. 1222-1226 (1993)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Wada, Y., Fujisawa, R.and Kuboki, Y.: "A simple method to survey proteins which affect in vitro mineralization." Japanese Journal of oral Biology. 35-4. 439-442 (1993)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Fujisawa, R.and Kuboki, Y.: "Proteolytic analysis of dentin and bone acidic proteins adsorbed on hydroxyapatite crystals." Bulletin de 1'Institute oceanographique Monaco. Sp.13, (in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Fujisawa, R., Zhou, H-Y.and Kuboki, Y.: "In vitro and in vivo association of dentin phosphophoryn with alpha 1 CB6 peptide of type I collagen." Connective Tissue Research. 30(in press).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より