| 研究課題/領域番号 |
04671318
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| 研究機関 | 京都薬科大学 |
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研究代表者 |
木藤 正弘 京都薬科大学, 薬学部, 助手 (00153148)
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| 研究分担者 |
竹島 繁雄 京都薬科大学, 薬学部, 助手 (60236461)
桜井 弘 京都薬科大学, 薬学部, 教授 (30065916)
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| キーワード | シトクロムP-450 / 二相系化学モデル / 相関分配機構 / ナフタレン / ナフトール / マンガン-ポリフィリン錯体 |
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| 研究概要 |
親水性および脂溶性の両反応場をもつ相間分配機構を有するシトクロムP-450の二相系化学モデルを作成することを目的とした。基質としてナフタレン関連化合物を選択し種々の検討した。脂溶性担体のスチレン-ジビニルベンゼン重合体(XAD-2、50mg)に脂溶性のMn-tetraphenylporphyrin(1,4mumol)を分配させ脂溶性反応場を作製し、親水相(分配相、2ml)として電子伝達物質(還元剤)の水素化ホウ素ナトリウム(530mumol)および基質(100mumol)を含む20-50%アセトニトリル水溶液を用いて反応することにより、P-450類似の反応性を示し、次の結果を得た。1.主反応生成物の1-および2-ナフトールの生成比は80:20となり、ミクロソームによる反応では95:5、XAD-2を取除いた系では薬70:30となった。またXAD-2量に依存して1-ナフトールの割合が増大する事が示され、XAD-2を添加し二相反応を行うことにより、ミクロソーム系に類似することが示された。また、XAD-2添加により反応性が増大した。2.基質濃縮性があり、低濃度の基質反応においても有用性が認められた。3.生成したナフトールの一部がフタル酸に分解された。このことから本モデル系においてスーパーオキシドアニオン(O_2^-)が生成していることが示唆された。4.活性酵素種を特定するため、種々のラジカル消去剤または酵素を添加し反応性を検討したところ、O_2^-の消去酵素であるスーパーオキシドジスムターゼの添加により反応性の低下が認められ、本モデル系において活性酸素種はO_2^-であることが示唆された。5.本モデルは相関分配機構を有しており、また脂溶性環境下での反応(P-450反応)と同時に親水性環境下での反応(酵素反応等)が可能であることが示された。これらの結果から、本モデル系でP-450の電子伝達系(水相〓反応相〓金属ポリフィン)などの反応機構の解析が可能であると思われる。
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