血管および腸平滑筋ホスホリパーゼAの酵素化学的性質と生理的役割

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04680190
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 東城 博雅 大阪大学, 医学部, 講師 (90135707)
• キーワード: ホスホリパーゼA_2 / 血管平滑筋 / 牛大動脈中膜 / ホスホリパーゼB / リン脂質

研究概要

(1)前年度、ウシ大動脈中膜ホスホリパーゼA(PLA)は、Ca^<2+>イオン存在下に4℃で日オーダのゆっくりしたタイムコースで活性化されることを見いだしたのでこの活性化に関与する因子の検索を行い、以下の結果を得た。a.活性化に対する2価イオンの効果は、Ca^<2+>>Sr^<2+>>Mg^<2+>であり、調べた限り他のイオンでは活性化は起こらなかった。b.プロ酵素の限定分解によるPLAの活性化の可能性を検討するためSHプロテアーゼ阻害剤、セリンプロテアーゼ阻害剤でPLAの活性化の効果を調べたところ、セリンプロテアーゼ阻害剤でPLAの活性化が著名に抑制された。c.グアニンヌクレオチド誘導体(GTP、GMP、cGMP、グアノシン)はPLAの活性化を促進した。d.NO発生剤であるNaN_3、NaNO_2、イソソルバイドはPLAの活性化を抑制した。
(2)PLAの精製収率の再現性が乏しく精製法の再検討をした。非イオン性界面活性剤C_<12>E_8の溶離液への添加により収率がある程度改善されることがわかった。
(3)大動脈PLAは、I群およびII群PLA_2と免疫学的に異なっていた。

研究成果

• [文献書誌] Tojo,H et al.: "High performance liquid chromatographic assay of phospholipases.Application to spectrophotometric detection of PLA_2" J.Lipid Res.34. 837-844 (1993)
• [文献書誌] Tojo,H et al.: "Purification and characterization of guinea pig gastric phospholipase A_2 of the pancreatic type" Eur.J.Biochem.215. 81-90 (1993)
• [文献書誌] Zhao,Y.et al.: "Cloning and expression of phospholipase A_2 from guinea pig gastric mucosa,its induction in vivo and secretion by carbachol" Eur.J.Biochem.215. 91-97 (1993)
• [文献書誌] Minami,T.et al.: "Purification of characterization of a phospholipase A_2 from human ileal mucosa" Biochim.Biophys.Acta. 1170. 125-130 (1993)
• [文献書誌] Minami,T.et al.: "Elevation of group II phospholipase A_2 protein in sera of patients with Crohn's disease and ulcerative colitis" Am.J.Gastroenterol.88. 1076-1080 (1993)
• [文献書誌] Yamamoto,K.et al.: "Serum pancreatic phospholipase A_2 in acute pancreatitis and after endoscopic retrograde pancreatography" Gastroenterol.Jpn.28. 679-686 (1993)