1993 年度実績報告書

線維化に於ける形態制御の研究

研究課題

研究課題/領域番号	04807021
研究機関	産業医科大学
研究代表者	平野英保産業医科大学, 医学部, 講師 (50040241)
研究分担者	後藤貞夫産業医科大学, 医学部, 助教授 (50131917) 東監産業医科大学, 医学部, 教授 (30028386)
キーワード	形態制御 / ファイブロネクチン / コラーゲン / プロフィリン / 四塩化炭素 / 細胞外マトリックス / 再生肝 / ノーザンブロット
研究概要	形態制御は、細胞膜周辺に存在する多細胞構築を行なう蛋白群によってコントロールされると考えられるので、ファジーセットクローニング法を適用する事とした。先ず骨子として、基底膜に対する抗体を使用して、lambdagt11の蛋白発現型のcDNA Libraryより陽性プラークを拾って来た。次に、これらのクローンが、実際に形態制御に関与しているかどうかをラットに四塩化炭素で引き起こした肝硬変で調べた。ここで有意に発現が変動したものは、塩基配列を決定し、コンピューターによるホモロジー検索を行い新しい蛋白か、有意義な蛋白かの決定を行ないプロフィリンを見つけた。ラットに四塩化炭素肝硬変を作製し経時的に72hrsプロフイリンやファイブロネクチンやType I,III,IV mRNAの発現パターンを比較検討した(Acute Phase)。次に、Acute on Chronic Phaseのパターンを観て、Chronic Phaseに於ける四塩化炭素の注射の効果の相違を観た。更に、再生肝に於けるパターンを観て線維化と再生の違いを検討した。Acute phaseで、四塩化炭素注射後ファイブロネクチン、プロフィリンのmRNAの上昇を認めた。Chronic Phaseでは、注射後72時間後のプロフィリンは上昇していた。ファイブロネクチンは、自然成長コントロールよりも低かった。平成5年度は、線維の侵行にそってプロフィリンが、活性化しているのかどうかを詳細に観るために、プロフィリンのペプチドに対する抗体を作製し、正常と線維化した肝臓の組織で、蛍光抗体による観察を行った。プロフィリンの蛍光抗体法による染色でプロフィリンは線維化の方向に一致して局在していた。再生肝のパターンとは、全く違っていた。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Hayato Nakamura: "Increase of Hepatic mRNA of Profilin,Actin and Tetrachloride Treatment and Extracellular Matrix Proteins after Carbon Tetrachloride Treatment and Partial Hepatectomy in Rats" Bicohem.Biophys,Res,Commun.198. 568-573 (1994)
[文献書誌] Kiyotaka Shibata: "An attempt to substitute the cell binding domain of human fibronectin in lambda phage J protein:Computer design and expression" Biochimie. 75. 459-465 (1993)
[文献書誌] Kazuki Okamoto: "MOLECULAR CLONING OF RAT LIVER GLUCOCORTICOID-RECEPTOR TRANSLOCATION-PROMOTER" BIOCHEM.BIOPHYS.RES.COMM^-.193. 848-854 (1993)
[文献書誌] Hisamitsu Ohmori: "Comparison of Ki-ras gene mutation among simultaneously occurring multiple urethan-induced lung tumors in individual mice" Carcinogenesis. 13. 851-855 (1992)
[文献書誌] Keji HIRANUMA: "Induction of Mitochondrial Chaperonin,Hsp60,by Cadmium in Human Hepatoma Cells" BIOCHEM.BIOPHYS.RES.COMM.194. 531-536 (1993)
[文献書誌] Hideyasu Hirano: "DNA Sequence Analysis System:GENE grade VII." Computer Programs. (1993)

1993 年度 実績報告書

線維化に於ける形態制御の研究

研究代表者

平野 英保 産業医科大学, 医学部, 講師 (50040241)

研究成果

[文献書誌] Hayato Nakamura: "Increase of Hepatic mRNA of Profilin,Actin and Tetrachloride Treatment and Extracellular Matrix Proteins after Carbon Tetrachloride Treatment and Partial Hepatectomy in Rats" Bicohem.Biophys,Res,Commun.198. 568-573 (1994)

[文献書誌] Kiyotaka Shibata: "An attempt to substitute the cell binding domain of human fibronectin in lambda phage J protein:Computer design and expression" Biochimie. 75. 459-465 (1993)

[文献書誌] Kazuki Okamoto: "MOLECULAR CLONING OF RAT LIVER GLUCOCORTICOID-RECEPTOR TRANSLOCATION-PROMOTER" BIOCHEM.BIOPHYS.RES.COMM^-.193. 848-854 (1993)

[文献書誌] Hisamitsu Ohmori: "Comparison of Ki-ras gene mutation among simultaneously occurring multiple urethan-induced lung tumors in individual mice" Carcinogenesis. 13. 851-855 (1992)

[文献書誌] Keji HIRANUMA: "Induction of Mitochondrial Chaperonin,Hsp60,by Cadmium in Human Hepatoma Cells" BIOCHEM.BIOPHYS.RES.COMM.194. 531-536 (1993)

[文献書誌] Hideyasu Hirano: "DNA Sequence Analysis System:GENE grade VII." Computer Programs. (1993)

1993 年度実績報告書

平野英保産業医科大学, 医学部, 講師 (50040241)