EGF受容体機能のP_2プリン受容体並びに関連の細胞内情報伝達系を介した調節機構

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04807133
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 細井 和雄 徳島大学, 歯学部, 教授 (10049413)
• キーワード: P_2プリン受容体 / EGF受容体 / 蛋白質りん酸化 / イノシトール代謝 / 細胞内カルシウム / カルシウムインフラックス

研究概要

プリン受容体はBurnstockによってP_2およびP_2の2種類に分類され,前者はアデノシンとAMPに特異性が高く,アデニレートシクラーゼ系の活性化あるいは抑制に関与していること,また後者はADPとATPにより特異性が高く,PLC-Ca^<2+>系を賦活することが明らかにされている.またP_1受容体はさらにA_1〜A_3に,そしてP_2受容体はP_<2X>,P_<2Y>,P_<2T>,P_<2Z>などの受容体サブクラスに細分類されている.神経,筋における本受容体の機能はいくつか知られているが,上皮組織における本受容体の生理機能についてはなお不明な点が多い.本年度は,EGF受容体を多量に発現しているA-431ヒト類表皮癌培養細胞を用いてEGF刺激およびプリン受容体刺激がおよぼすホスファチジ-ルイノシトールりん酸生合成についての研究を行い以下の結果を得た.
イノシトールりん酸は細胞の生理機能の調節に重要な働きをする.したがってその前駆体であるホスファチジ-ルイノシトールおよびそのりん酸化物の生合成系も,枯渇されないように調節されなければならないと考えられる.そこで本研究では特にホスファチジ-ルイノシトールりん酸(PI)の生合成調節機構を調べた.A-431細胞において,ATP刺激はPKC活性を活性化し,[Ca^<2+>]_iを上昇させると同時に百日咳毒素非感受性のPLDを活性化しホスファチジン酸(PA)を供給した.PA,PKC,[Ca^<2+>]_iの三者が協調してPI合成が促進された.一方,同細胞をEGFで刺激した場合もPI合成の促進が認められたが,この場合PAはDGキナーゼの活性化によって供給され,ATPの場合と同じく上記3種の因子の上昇が必須であった.以上のことから,ATPやEGFはそれぞれの受容体を介し,細胞のシグナル伝達系を駆動し,細胞の生理機能を調節する.一方,シグナル伝達系を駆動するATPやEGFがセカンドメッセンジャー前駆体の生合成そのものをも刺激することが本研究において示された.

研究成果

• [文献書誌] Hosoi,K.et al.: "Additive and/or synergistic of 5α-dihydrotestosterone,dexamethasone,and triiodo-L-thyronine on..." Endocrinology. 130(2). 1044-1055 (1992)
• [文献書誌] Hosoi,K.et al.: "P_2-Purinergic receptors and cellular calcium metabolism in A 431 human epidermoid carcinoma cells." American Journal of Physiology. 262(31). C635-643 (1992)
• [文献書誌] Kurihara,K.et al.: "Characterization of ecto-nucleoside triphosphatase on A-431 human epidermoidal carcinoma cells." Enzyme. 46(4-5). 213-220 (1992)
• [文献書誌] 丸山七朗他: "脳下垂体除去マウス顎下腺の各種proteinase(F,D,A,P)及びEGFに対する女性ホルモンと副腎皮質及び甲状腺ホルモンの併用による動態" 日本唾液腺学会誌. 33. 35-39 (1992)
• [文献書誌] Hosoi,K.et al.: "Bradykinin-stimulated phosphorylation and dephosphorylation of epidermal growth factor receptors in A-431 human epidermoid carcinoma cells." Journal of Cellular Physiology. 157(1). 1-12 (1993)
• [文献書誌] Maruyama,S.et al.: "Effects of female hormones and 3,5,3'-triiodothyronine or dexamethasone on induction of epidearmal growth factor and...." Endocrinology. 133(3). 1051-1060 (1993)
• [文献書誌] 熱海知子 他: "A-431ヒト類表皮癌細胞のEGF刺激によるrounding形成とEGF高親和性結合部位との関係" 明海大学歯学雑誌. 22(1). 72-84 (1993)
• [文献書誌] Hosoi,K.et al.: "Identification of mK1,a true tissue(glandular)kallikrein of mouse submandibular gland:Tissue distribution and..." Journal of Biochemistry. 115(1). 137-143 (1994)
• [文献書誌] Kurihara,K.et al.: "Effects of nerve growth factor and dexamethasone on Na^+,K^+-ATPase of cultured PC12 cells." Hormone and Metabolic Research. 26(1). 14-18 (1994)
• [文献書誌] Atsumi,T.et al.: "Involvement of high affinity binding site for EGF receptor in formation of rounding in A-431 epidermoid carcinoma cells." Hormone and Metabolic Research. 26(3). 141-144 (1994)
• [文献書誌] 坂田俊夫 他: "マウス耳下腺に対する各種ホルモンの薬理学的研究第2報マウス耳下腺内のamylase活性における脳下垂体除去およびそのホルモン投与の影響" 明海大学歯学雑誌. 23(1). 104-110 (1994)
• [文献書誌] Tajima,Y.et al.: "Computer-aided image analysis applied to immunogold-silver staining:evaluation of proliferating cell nuclear antigen(PCNA)-reactive..." Histochemistry. 102(3). 177-181 (1994)
• [文献書誌] 細井和雄 他: "唾液腺カリクレインの生理機能と分子多様性" 日本唾液腺学会誌. 35. 50-52 (1994)
• [文献書誌] Qu,J.et al.: "Effects of FMLP and LPS on [Ca^<2+>]_i of peritoneal exudate poly-morphonuclear leukocytes following onset of inflammation." Journal of Periodontal Research. (in press). (1995)
• [文献書誌] 細井和雄 他: "咀嚼系の唾液腺生理活性因子に対する影響(総説)" 日本咀嚼学会誌. 3. 11-16 (1993)
• [文献書誌] 細井和雄 他: "EGFおよび関連プロテアーゼの唾液腺における発現(総説)" 四国歯学会雑誌. 7(2). 1-12 (1994)
• [文献書誌] 細井 和雄(分担)他: "スタンダード口腔生理学(上羽隆夫編集)" 学建書院(東京), 366 (1994)
• [文献書誌] 細井 和雄(分担)他: "分子細胞生物学基礎実験法(堀尾武-監修)" 南江堂(東京), 506 (1994)