コレシストキニン/ガストリン受容体を介するヒト癌細胞増殖の分子機構

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05152083
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 松井 利充 神戸大学, 医学部・附属病院, 講師 (10219371)
• 研究分担者: 千葉 勉 神戸大学, 医学部, 教授 (30188487)
• キーワード: コレシストキニン / ガストリン / 受容体 / チロシンキナーゼ / FAK / MAPキナーゼ / 遺伝子 / 相同組換え

研究概要

私達はcDNAクローニングによりヒト大脳コレシストキニン(CCK)-B受容体は胃ガストリン受容体と同一分子であり、細胞増殖促進作用を持つことを明らかにした。さらにヒトCCK-B/ガストリン受容体遺伝子はヒト第11番染色体短腕15.5-15.4の全長13kb以上におよぶ5個のエクソンから成る遺伝子(CCKBR)にコードされ、第4エクソンの3'測には2ヵ所のスプライシング部位が存在しうることも明らかにした。本受容体cDNA導入発現細胞において、CCKおよびガストリンはDNA合成を促進させるとともに、c-fos,c-mycなどの初期応答遺伝子発現を誘導する。さらにイノシトールリン酸産生や細胞内Ca^<2+>を上昇させるのみならず、p125^<FAK>(Focal Adhesion Kinase)およびMAPキナーゼなどの細胞質蛋白のチロシンリン酸化を誘導し、MAPキナーゼ活性を著明に上昇した。すなわち、G蛋白共役型受容体であるCCK-B/ガストリン受容体はその細胞増殖促進作用において、チロシンキナーゼ型受容体の細胞内信号伝達系とクロストークする可能性が示唆された。さらに、チロシンキナーゼ型受容体との共役がすでに明らかにされているその他の細胞内情報伝達分子(Rasなどの低分子量G蛋白,Srcなどの非受容体型チロシンキナーゼ)との共役を明らかにするとともに、CCK-B/ガストリンがアクチンストレスファイバー再構築を著明に誘導することを見い出した。また現在、CCK-B/ガストリン受容体の中枢神経系などにおける生理的意義の解明を目的として、本受容体遺伝子ノックアウトマウスを作成している。ヒト癌細胞における発現については、生検材料を用いRT-PCR法などを用い検討し、本受容体発現が肺小細胞癌診断の分子マーカーとなることを見い出している。さらにヒト癌細胞株に対して増殖抑制効果を持つヒトCCK-B/ガストリン受容体特異的拮抗薬を見い出した。

研究成果

• [文献書誌] Shigeyoshi,Y.: "Distribution of mRNA for CCK-B receptor in the brain of Mastomys Natalensis:Abundant expression in telencephalic neurons" Brain Research. (in press).
• [文献書誌] Taniguchi,T.: "Cholecystokinin-B/gastrin receptor signaling pathway involves tyrosine phosphorylations of p125^<FAK> and p42^<MAP>" Oncogene. 9. 861-867 (1994)
• [文献書誌] Takaishi,T.: "Transforming growth factor-β-induced macrophage colony-stimulating factor gene expression in various mesenchymal cell lines" American Journal of Physiology. (in press).
• [文献書誌] Ito,M.: "Alternative splicing generates two distinct transcripts for the Drosophila melanogaster fibroblast growth factor receptor homolog" Gene. (in press).
• [文献書誌] Zimonjic,D.B.: "Localization of the human cholecystokinin-B/gastrin receptor gene (CCKBR) to chromosome 11p15.5-15.4 by fluorescence in situ hybridization" Cytogenetics and Cell Genetics. 65. 184-185 (1994)
• [文献書誌] Tsukamoto,T.: "Retinoic acid differentially affects platelet-derived growth factor- and epidermal growth factor-regulated cell growth of mouse osteoblast-like cells" Cell Growth and Differentiation. 5. 207-212 (1994)
• [文献書誌] Ito,M.: "Functional characteization of a human brain cholecystokinin-B receptor:A trophic effect of cholecystokinin and gastrin" Journal of Biological Chemistry. 268. 18300-18305 (1993)
• [文献書誌] Matsui T.: "Human neuroblastoma cells express α and β platelet-derived growth factor receptors coupling with neurotrophic and chemotactic signaling" Journal of Clinical Investigation. 92. 1153-1160 (1993)
• [文献書誌] Nakata,H.: "Gastrin/CCK-B receptors on brain,gastric parietal cells and ECL carcinoid tumor of Mastomys natalensis" Kobe Journal of Medical Science. 39. 161-170 (1993)
• [文献書誌] Chiba,T.: "Gastrin" Raven Press, 432 (1993)
• [文献書誌] Matsui,T.: "Growth Factors-Cell Growth,Morphogenesis,and Transforma-tion.Gann Monograph on Cancer Research 42" CRC Press (in press), (1994)