6-OHDA及びMPPのよる黒質線条体系ドーパミン神経細胞死とフリーラジカル

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05251217
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 井端 泰彦 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (10079684)
• 研究分担者: 玉田 善堂 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (60254364) ; 吉川 敏一 京都府立医科大学, 医学部, 講師 (90158410) ; 田口 淳一 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (50188132) ; 一谷 幸男 筑波大学, 心理学系, 助教授 (80176289) ; 岡村 均 京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60158813)
• キーワード: 6-CHDA / ドーパミン / NCS / プロテインカイネースC / 免疫細胞化学 / 生化学 / 線条体 / 黒質

研究概要

黒質線条体系を中心とするドーパミンニューロンについて以下の研究を行った。
【.encircled1.】線条体6-OHDA投与による黒質ドーパミン神経細胞死の生化学的検討:ラットを用い片側線条体に6-OHDA(20mg/10mul)を投与し、10ケ月までのさまざまの期間、後脳を摘出、線条体のPA,HVA,DOPACを生化学的に測定した結果、投与側は健常側の34〜44%に減少し、黒質では49〜60%に減少していた。この所見は前年度に行ったTHの抗血清と用いた免疫細胞化学によるドーパミンニューロンの障害の形態学的所見と良く一致していた。この事実は黒質のみではなく、線条体もパーキンソン病の初発部位としての可能性が高いことを示唆している。
【.encircled2.】6-OHDA投与によるドーパミン細胞死におけるNOの関与:ラットへの6-OHDAを大槽内または脳室内へ投与し10週齢に成熟させた群成熟期に脳室内に6-OHDAを授与した群を作製し、ドーパミンニューロン同定のためにはTHの抗血清を用いる免疫細胞化学NOS産生ニューロン検出のためにbeta-NADPH及NADPH-alpha組織化学を行った。結果としては、NADPH-alpha陽性ニューロンはドーパミンニューロンの分布する腹側被蓋内側部、吻側縫線核に多く分布したが、腹側被蓋野障害において、NOS産生ニューロンは6-OHDAの毒性に抵抗性があることが判明した。
【.encircled3.】メタンフェタミン(MAP)投与による線条体ドーパミンニューロン終末修飾時における受容ニューロン内プロティンキナーゼC(PKC)の動態について:広義の神経毒であるMAP投与による線条体におけるニューロン因PKCの動態について免疫細胞化学及びイムノブロッテイングを行い検索した。結果として、線条体ドーパミンニューロン終末をMAPにより修飾した場合に、受容ニューロンを考えられるGABAニューロンにおいて細胞内情報蛋白質の一つであるPKCの動態変化が誘発されていることがわかった。

研究成果

• [文献書誌] Yokoyama,C: "Autorad iographic distribution of [3H]YM-0915-2,a high affinity and selective antagonist ligand for dopamine D_2 receptorgroup in rat brain and spinal cord." J Comp.Neurol.(in press). (1994)
• [文献書誌] Ichitani,Y: "Cholinergic neurons contain calbindin-D_<28>K in the monkey medial septal nucleus and uncleus of the diagonal band:an immunocytochemical study." Brain Res.625. 328-332 (1993)
• [文献書誌] Tanaka,M: "The direct retinal projection to VIP neuronal elevnents in the rat SCN" Brain.Res.Ball. 31. 637-640 (1993)
• [文献書誌] Ibata,Y: "Neuronal interaction between VIP and vasopression neurons in the rat suprachiasuntic nucleus." Neuroreport. 4. 128-130 (1993)
• [文献書誌] Ibata,Y: "Light and electron microscopic immunocytochemistry of VIP neurons in the suprachiasmatic nucleus of the Jopanese monkey." Biomed.Res.13(2). 59-62 (1992)
• [文献書誌] Ichitani,Y: "Learning behavior in chronic vitamin E-dificient and-supplemented rats:radial arm waze learning and pessive avoidance respouse." Behavior.Brain Res.51. 157-164 (1992)
• [文献書誌] 井端,泰彦: "最新内科体系に視床下部-下垂体後葉系の形態、間脳-下垂体疾患、内分泌疾患へ" 中山書店・東京(編集 井村裕夫・尾形悦郎・高久史麿・重井清一郎), 7(33-39) (1993)
• [文献書誌] Ibata,Y: "Electron mycroscopic immunocytochemistry of neuropeptides and neurotrans-witters.In Electrow microscopic cytochemistry & immunocytochemistry in biomedicine(et.by T.Ogawa & T.Barka)" CRC Press Boca Roton,Fluw Arbar London Tokyo, 10(309-318) (1993)