1993 年度実績報告書

ストレスによる細菌病原因子の変化・変異の分子機構

研究課題

研究課題/領域番号	05268203
研究機関	筑波大学
研究代表者	林英生筑波大学, 基礎医学系, 教授 (40033203)
研究分担者	青木泰子筑波大学, 臨床医学系, 講師 (80202480) 清水徹筑波大学, 基礎医学系, 講師 (80235655) 太田敏子筑波大学, 基礎医学系, 講師 (40233134)
キーワード	黄色ブドウ球菌 / ストレス応答 / 熱ショック蛋白 / メチシリン耐性因子 / パリンドローム構造 / 熱ショックブロモーター / コラゲナーゼ / エンテロトキシン
研究概要	黄色ブドウ球菌の病原因子産生にストレスがどのように影響を与えるかをしらべるためにストレスに応答して産生(発現)される蛋白を解析した。培養温度を37℃から42℃へ移し熱ストレスを負荷すると10種類以上の蛋白が多量に産生されてくる。そのいくつかはアミノ酸分析の結果、熱ショック蛋白であることがわかったので、その内、hsp60とhsp70の遺伝子(オペロン)をクローン化し構造を決定した。hsp60はHSP10とHSP60の2種類の蛋白をコードしており、hsp70はHSP37、HSP20、HSP70、HSP40、HSP35の5種類をコードしていた。この内HSP20はE.coliのGrpEと、HSP40はDnaJと、HSP70はDnaKと高い相同性があったがHSP37とHSP35はE.coliには認められず、新しい熱ショック蛋白であった。またHSP37は他のGram陽性菌にも相同性の高い構造があり、Gram陽性菌に共通的に保存されている構造であるらしい。HSP35はブドウ球菌に特異的な構造であったが、その機能については目下解析中である。これらの熱ショック蛋白の遺伝子のオペレーター構造は特徴的なパリンドローム構造を持ち、この構造もGram陽性菌に共通性の高い構造であり、発現調節に何らかの関与をしているらしいことが推察される。E.coliへ形質転換したhsp60は構造的に発現し熱ショックでは誘導発現されないことがわかり、また20℃の培養では発現せず、σ^<32>欠損株でも発現しなかった。42℃の熱ショックで病原因子である、コラーゲナーゼとメチシリン耐性因子の産生は低下ないし抑制されるが、DNaseやエンテロトキシンの産生はあまり影響を受けない。発育増殖期を感知して病原因子産生を調節しているらしいagrとの関連を比較検討しながら、HSPsがどのように病原因子の発現、分泌に関与しているかに的を紋り黄色ブドウ球菌内での遺伝子操作が出来るよう変異株を分離しながら鋭意解析を進めている。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] T.Ohta et al: "Molecular characterization of the gene operon of heat shock proteins HSP60 and HSP10 in Methicillin-resistant S.aurens" Biochem.Biophys.Res.Comm.193. 730-737 (1993)
[文献書誌] T.Ohta et al: "Heat shock promoter of thernophilic chaperonin operon" Biochem.Biophys.Res.Comm.191. 550-557 (1993)
[文献書誌] T.Ohta et al: "Molecular characterization of the gene operon,S70,comprising grpE,dnak,dnaJ homologues,and ta new heat shockgenes MS S.aurens" J.Bacteriol. 176(in press). (1994)
[文献書誌] T.Shimizu et al: "The virR gene,a member of a class of two component response regulators,regulates the production of pertringtlysin O,collagenase‥" J.Bacteriol. 176(in press). (1994)
[文献書誌] N.Sakurai et al: "The rice culture filtrates of B.cerens isolated from emetic type food paisoning causes mitochondrial swelling in aHEp-2 cell" Microbiol.Imnunol.38(in press). (1994)
[文献書誌] 林英生: "腎盂腎炎とbacterial biofilm" Annual Review 腎臓 1993. 103-108 (1993)
[文献書誌] 林英生: "医科細菌学(分担)" 吉川昌之介編南江堂, 300(12) (1994)

1993 年度 実績報告書

ストレスによる細菌病原因子の変化・変異の分子機構

研究代表者

林 英生 筑波大学, 基礎医学系, 教授 (40033203)

研究成果

[文献書誌] T.Ohta et al: "Molecular characterization of the gene operon of heat shock proteins HSP60 and HSP10 in Methicillin-resistant S.aurens" Biochem.Biophys.Res.Comm.193. 730-737 (1993)

[文献書誌] T.Ohta et al: "Heat shock promoter of thernophilic chaperonin operon" Biochem.Biophys.Res.Comm.191. 550-557 (1993)

[文献書誌] T.Ohta et al: "Molecular characterization of the gene operon,S70,comprising grpE,dnak,dnaJ homologues,and ta new heat shockgenes MS S.aurens" J.Bacteriol. 176(in press). (1994)

[文献書誌] T.Shimizu et al: "The virR gene,a member of a class of two component response regulators,regulates the production of pertringtlysin O,collagenase‥" J.Bacteriol. 176(in press). (1994)

[文献書誌] N.Sakurai et al: "The rice culture filtrates of B.cerens isolated from emetic type food paisoning causes mitochondrial swelling in aHEp-2 cell" Microbiol.Imnunol.38(in press). (1994)

[文献書誌] 林 英生: "腎盂腎炎とbacterial biofilm" Annual Review 腎臓 1993. 103-108 (1993)

[文献書誌] 林 英生: "医科細菌学(分担)" 吉川昌之介編 南江堂, 300(12) (1994)

1993 年度実績報告書

林英生筑波大学, 基礎医学系, 教授 (40033203)

[文献書誌] 林英生: "腎盂腎炎とbacterial biofilm" Annual Review 腎臓 1993. 103-108 (1993)

[文献書誌] 林英生: "医科細菌学(分担)" 吉川昌之介編南江堂, 300(12) (1994)