染色体凝縮開始とMPF活性化の調節

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05269104
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 西本 毅治 九州大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (10037426)
• 研究分担者: 田中 啓二 徳島大学, 酵素科学研究センター, 教授 (10108871) ; 佐方 功幸 久留米大学, 分子生命科学研究所, 教授 (80142024) ; 舛本 寛 名古屋大学, 理学部, 助手 (70229384) ; 小林 英紀 九州大学, 大学院医学系研究科, 助教授 (20150394) ; 菊池 淑子 東京大学, 大学院理学系研究科, 助教授 (00138124)
• キーワード: 染色体 / MOS / CDC2 / G2 / サイクリン / セントロメア / プロテアソーム

研究概要

本年度は重点研究の第2年度であり、初年度の基礎の上に各班員において研究の進展がみられた。班員各位の成果を簡単にのべると、
西本:酵母の系を用いたタンパク補足法(Two hybrid system)を導入し核内GタンパクRanとそのGDP/GTP交換タンパクであるRCC1に特異的に結合するタンパクを検索した、その結果、Ranと結合するタンパクとして3個が分離された。その内の一個は既知のRan BP1であり新たにRanBP2とRanBP3が分離された。RanBP2はこれまでその存在が示唆されていた300kDaの核膜孔タンパクであることが判明した。菊池:出芽酵母のG2期からM期への移行に欠損がある温度感受性変異株tom1について解析し、変異遺伝子TOM1とtom1のサプッレサ-遺伝子、STO1、STO2を分離した。小林:ツメガエルのサイクリンAを出芽酵母で発現させて細胞周期に及ぼす効果を調べた。この結果、サイクリンAはcdc28と結合しそのキナーゼ活性により酵母はS期でとまることが判明した。佐方:ツメガエル卵成熟過程においてMosの機能を特異的に阻害すると第一減数分裂と第二減数分裂の間にDNA複製が起こることが分かった。この結果、Mosは単為発生の抑制をしていることが推測された。田中:プロテアソームを構成する複数の制御蛋白質群の構造を明らかにした結果、これらの多くが細胞周期遺伝子や転写遺伝子であることが判明した。プロテアソームは機能因子群のの細胞内動態を監視して細胞周期の進行を統御していると推測される。舛本:セントロメア抗原蛋白CENP-BのDNA結合ドメインのみをヒト細胞中で発現させるとセントロメア領域の肥大化、M期の延長が観察された。足立:DNA複製の開始過程に関与する分裂酵母Ddal,Nda4の細胞内局在、とその機能を生化学的に解析した。その結果、両タンパクともオリゴマーとして存在することを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] M.Dasso,T.Seki,Y.Azuma,T.Ohba and T.Nishimoto: "A mutant form of the Ran/TC4 protein disrupts nuclear functionin Xenopus laevis extracts by inhibiting the RCC1 protein,a regulator of chromosome condensation." EMBO.J.13. 5732-5744 (1994)
• [文献書誌] H.Kobayashi,E.Stewart,R.Poon and T.Hunt: "Cyclin A and cyclin B dissociate from p34cdc2 with half-times of 4 and 15 h,respectively,regardless of the phase of the cell cycle." J.Biol.Chem.269. 29153-29160 (1994)
• [文献書誌] K.Kitagawa,H.Masumoto,M.Ikeda and T.Okazaki: "Analysis of protein-DNA and protein-protein interaction of centromere protein B (CENP-B) and properties of the complex in the cell cycle." Mol.Cell.Biol.(印刷中).
• [文献書誌] N.Furuno,M.Nishizawa,K.Okazaki et.al.: "Suppression of DNA replication via Mos function during meiotic divisions in Xenopus oocytes." EMBO.J.13. 2399-2410 (1994)
• [文献書誌] K.Akiyama,K.Yokota,S.Kagawa et.al.: "cDNA cloning and interferon-v down -regulation of protesomal subunits X and Y." Science. 265. 1231-1234 (1994)
• [文献書誌] Y.Adachi and U.K.Laemmli: "Study of the cell cycle-dependent assembly of the DNA pre-replication centres in Xenopus egg extracts." EMBO.J.13. 4153-4164 (1994)