プロスタノイド受容体の構造と機能の研究

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05404020
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 成宮 周 京都大学, 医学部, 教授 (70144350)
• 研究分担者: 籾山 俊彦 京都大学, 医学部, 助手 (20230055) ; 牛首 文隆 京都大学, 医学部, 助手 (50243035) ; 垣塚 彰 京都大学, 医学部, 講師 (80204329)
• キーワード: プロスタグランジン / プロスタグランジン受容体 / G蛋白質 / 情報伝達 / 遺伝子 / アポプトーシス / 胸腺

研究概要

プロスタノイド受容体のcDNAクローニングを推進し、これまで明らかであったトロンボキサン受容体、プロスタグランジン(PG)E受容体EP_3サブタイプに加え、新たにPGE受容体のEP_1,EP_2の2つのサブタイプ、PGF受容体、PGI受容体の構造を明らかにした。また、これら受容体mRNAのノザン解析を行い、これらの受容体が各々特異的な体内分布を示すことを明らかにした。更に、ウシ副腎及びマウスにおいてEP_3受容体がC末端でオルタナティブスプライシングを受け、複数のアイソフォームを生じることを明らかにした。ウシでは、4種のアイソフォーム、A,B,C,Dが産生され、これらは同様の結合活性を示すが、C末端の違いにより異なったG蛋白質に共役し、異なった情報伝達をおこすことを見出した。また、マウスのα,β,γのアイソフォームでは、C末端の差によりG蛋白共役の効率や脱感作に対する感受性に差がみられることを見出した。更に、ヒト、トロンボキサン受容体の遺伝子の構造を明らかにし、これが19番目染色体p13.3に位置することを見出した。また、マウストロンボキサン受容体の胸腺での分布を調べ、これが、CD4^-8^-,CD4^+8^+などの未熟胸腺リンパ球に強く発現されていること、トロンボキサン添加でこれらの細胞にアポプトーシスがおこることを見出した。

研究成果

• [文献書誌] Honda,A.,et al.: "Cloning and Expression of a cDNA for Mouse Prostaglandin E Receptor EP_2 Subtype." The Journal of Biological Chemistry.268. 7759-7762 (1993)
• [文献書誌] Negishi,M.,et al.: "Two Isoforms of Prostaglandin E Receptor EP_3 Subtype." The Journal of Biological Chemistry.268. 9517-9521 (1993)
• [文献書誌] Namba,T.,et al.: "Alternative splicing of C-terminal tail of prostaglandin E receptor subtype EP3 determines G-protein specificity." Nature.365. 166-170 (1993)
• [文献書誌] Ushikubi,F.,et al.: "Thromboxane A2 receptor is highly expressed in mouse immature Thymocytes and Mediates DNA fragmentation and apoptosis." Journal of Experimental Medicine.178. 1825-1830 (1993)
• [文献書誌] Nusing,R.M.,et al.: "Characterization and Chromosomal Mapping of the Human Thromboxane A_2 Receptor Gene." The Journal of Biological Chemistry.268. 25253-25259 (1993)
• [文献書誌] Watabe,A.,et al.: "Cloning and Expression of cDNA for a Mouse EP_1 Subtype of Prostaglandin E Receptor." The Journal of Biological Chemistry.268. 20175-20178 (1993)
• [文献書誌] Sugimoto,Y.,et al.: "Cloning and Expression of a cDNA for Mouse Prostaglandin F Receptor." The Journal of Biological Chemistry.269. 1356-1360 (1994)
• [文献書誌] Namba,T.,et al.: "cDNA cloning of a mouse prostacyclin receptor;multiple signaling pathways and expression in thymic medulla." The Journal of Biological Chemistry.(in press).