1994 年度実績報告書

テトラヒメナの分裂停止突然変異株を利用した細胞質分裂の分子機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号	05454025
研究機関	上武大学
研究代表者	渡邊良雄上武大学, 商学部, 教授 (00015918)
研究分担者	沼田治筑波大学, 生物科学系, 助教授 (50189354)
キーワード	テトラヒメナ / 分裂停止突然変異株 / 細胞質分裂 / p85 / EF-1α / TCBP-25 / TCBP-23
研究概要	テトラヒメナの分裂停止突然変異体のcdaAは分裂面決定因子に温度感受性の欠陥を持っており、その遺伝子産物p85の局在や性状の検討が計画課題であった。p85は免疫電顕で分裂予定面の後端に位置する基粒体の分裂溝へ向かうアクセサリーの先端部の表層膜直下に局在することが判明し、アクチンからなる収縮環微小繊維形成の重合核となることが強く示唆される結果を得た。また、p85の遺伝子解析ではp85の一部のアミノ酸配列を参照したプローブでテトラヒメナのcDNAライブラリーから二次スクリーニングまで終了し、現在、配列決定を行っているところである。テトラヒメナの分裂停止突然変異体のcdaCは分裂機構そのものに温度感受性の欠陥をもっており、アクチン微小繊維の束化因子が変異遺伝子産物であることを示唆する結果を報告してきた。一方、これまでにテトラヒメナのEF-1αがアクチンを束化するという成果を得てきたが、束化の条件を検討したところ、この束化がカルシウム・カルモジュリンで制御されているという大変興味ある結果がin vitroの実験から得られつつある。テトラヒメナの分裂溝収縮にはCa^<2+>-制御機構が存在すると考えられているが、テトラヒメナに存在する3種のCa^<2+>-結合蛋白質(カルモジュリン・TCBP-25・TCBP-23)のうちTCBP-25とTCBP-23の生物学的役割は全く検討されていなかった。今回、大腸菌でこれらの蛋白質を発現させ、特異抗体を調製して局在を調べたところ、両蛋白質は細胞内のCa^<2+>濃度を調節する役割を持つことが強く示唆された。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Watanabe,Y.,Numata,O.,Kurasawa,Y.& Katoh,M: "Cultivation of Tetrahymena cells" In Cell Biology:A Laboratory Handbook,ed.by J.E.Colis,Academic Press,San Diego. 398-404 (1994)
[文献書誌] Numata.O.,Suzuki,H.,Ohba,H.& Watanabe,Y.: "The mutant gene product of a Tetrahymena cell-division-arrest mutant cda A is localized in the accessory structure of specialized basal body close to the division furrow" Zool.Sci.(In Press). (1995)
[文献書誌] Takeda,T.,Kurasawa,Y.,Watanabe,Y.& Numata,O.: "Polymerization of highly purified Tetrahymena 14-nm filament Protein/citrate synthase into filaments and its possible role in regulation of enzymatic activity" J.Biochem.(In Press). (1995)
[文献書誌] Numata,O.,Yasuda,T.,& Watanabe,Y.: "Tetrahymena intramitochondrial filamentous inclusions contain 14-nm filament/citrate synthase" Exp.Cell.Res.(In Press). (1995)
[文献書誌] Watanabe,Y.,Hanyu,K.,Takemasa,T& Numata,O.: "TCBP-25" In Guidebook to the Calcium binding-Proteins,ed.by M.R.Cerio,Sambrook & Tooze Publication,Oxford University Press. (In Press). (1995)
[文献書誌] 渡邊良雄: "原生動物・繊毛虫・テトラヒメナ" 遺伝. 49. 2-3 (1995)

1994 年度 実績報告書

テトラヒメナの分裂停止突然変異株を利用した細胞質分裂の分子機構の解明

研究代表者

渡邊 良雄 上武大学, 商学部, 教授 (00015918)

研究成果

[文献書誌] Watanabe,Y.,Numata,O.,Kurasawa,Y.& Katoh,M: "Cultivation of Tetrahymena cells" In Cell Biology:A Laboratory Handbook,ed.by J.E.Colis,Academic Press,San Diego. 398-404 (1994)

[文献書誌] Numata.O.,Suzuki,H.,Ohba,H.& Watanabe,Y.: "The mutant gene product of a Tetrahymena cell-division-arrest mutant cda A is localized in the accessory structure of specialized basal body close to the division furrow" Zool.Sci.(In Press). (1995)

[文献書誌] Takeda,T.,Kurasawa,Y.,Watanabe,Y.& Numata,O.: "Polymerization of highly purified Tetrahymena 14-nm filament Protein/citrate synthase into filaments and its possible role in regulation of enzymatic activity" J.Biochem.(In Press). (1995)

[文献書誌] Numata,O.,Yasuda,T.,& Watanabe,Y.: "Tetrahymena intramitochondrial filamentous inclusions contain 14-nm filament/citrate synthase" Exp.Cell.Res.(In Press). (1995)

[文献書誌] Watanabe,Y.,Hanyu,K.,Takemasa,T& Numata,O.: "TCBP-25" In Guidebook to the Calcium binding-Proteins,ed.by M.R.Cerio,Sambrook & Tooze Publication,Oxford University Press. (In Press). (1995)

[文献書誌] 渡邊 良雄: "原生動物・繊毛虫・テトラヒメナ" 遺伝. 49. 2-3 (1995)

1994 年度実績報告書

渡邊良雄上武大学, 商学部, 教授 (00015918)

[文献書誌] 渡邊良雄: "原生動物・繊毛虫・テトラヒメナ" 遺伝. 49. 2-3 (1995)