動物のレンチウィルスのレセプターに関する研究

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05454123
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 長谷川 篤彦 東京大学, 農学部, 教授 (90011923)
• 研究分担者: 亘 敏広 東京大学, 農学部, 助手 (50220950) ; 辻本 元 東京大学, 農学部, 助教授 (60163804)
• キーワード: レンチウイルス / ネコ免疫不全ウイルス / レセプター / エンベロープ / アポトーシス / 病原性 / ネコ

研究概要

ネコ免疫不全ウイルス(FIV)による細胞障害の発現機構に関して検討した結果、FIV感染においてはアポトーシスによって細胞死が誘導されることが示唆された。CRFK細胞の系では、TNFを添加するとFIV感染細胞においては細胞の縮小およびクロマチンの濃縮を伴った細胞死が認められるのに対し、FIV非感染細胞においては全く形態の変化が認められなかった。また、TNF添加FIV感染細胞の染色体DNAを電気泳動したところ、ヌクレオソーム単位に断片化していることが確認された。これらのことから、FIV感染による細胞の変化がアポトーシスの誘導と密接に関連することが明らかとなった。
FIVレセプターを保有する細胞を生体内で証明するため、FIV抗体陽性ネコの末梢血単核細胞(PBMC)を免疫磁気ビーズによって分画した。PBMCを付着細胞、PanT(+),PanT(-),CD4(+),CD4(-)の分画に分け、その各分画から抽出したDNAについてPCR法によってFIVプロウイルスゲノムの増幅を行った。その結果、FIV感染ネコのPBMCにおいては、単球およびCD4(-)のT細胞が高率にFIVい感染していることが明らかとなった。
重度の免疫不全症、脳症、および骨髄障害によって死亡したFIV感染ネコの剖検材料(脳、脾臓、リンパ節、骨髄)からDNAを抽出し、PCR法によってFIV env遺伝子の可変領域の増幅を行い、その塩基配列の解析を行っている。現在までのところ、脳症で死亡したネコ由来FIVが、リンパ球指向性のTM2株やPPR株よりも、Petalma株に類似していることが示唆されている。
最近になって、英国のグループがCD9分子がFIVレセプターである可能性を示唆しており、我々の研究室でもネコCD9分子のクローニングを開始し、そのFIVレセプターとしての機能を解析する予定である。

研究成果

• [文献書誌] Ohno,Watari,Goitsuka,Tsujimoto,Hasegawa: "Altered surface antigen expression on peripheral blood mononuclear cells in cats infected with feline immunodeficiency virus." J.Vet.Med.Sci.54. 517-522 (1992)
• [文献書誌] Ohashi,Goitsuka,Watari,Tsujimoto,Hasegawa: "Elevated production of interleukin 6 in feline immunodeficiency virus infection." Clin.Immunol.Immunopathol.65. 207-211 (1992)
• [文献書誌] Momoi,Matasumoto,Watari,Goitsuka,Miyazawa,Mikami,Tsujimoto,Hasegawa: "Detection of feline immunodeficiency virus proviral DNA in feline peripheral blood mononuclear cells by nested two-stop polymerase chain reaction" Zbl.Bakt.279. 274-282 (1993)
• [文献書誌] Ohashi,Matsumoto,Watari,Goitsuka,Tsujimoto,Hasegawa: "Molecular cloning of feline interleukin-6 cDNA." J.Vet.Med.Sci.55. 941-944 (1993)
• [文献書誌] Ohno,Okamoto,Miyazawa,Mikami,Watari,Goitsuka,Tsujimoto,Hasegawa: "Induction of apoptosis in a T lymphoblastoid cell line infected with feline immunodeficiency virus." Arch.Virol.(in press). (1994)
• [文献書誌] Ohno,Nakano,Matsumoto,Watari,Goitsuka,Nakayama,Tsujimoto,Hasegawa: "Apoptosis induced by tumor necrosis factor in cells chronically infected with feline immunodeficiency virus." J.Virol.67. 2429-2433 (1993)