マウスおよびヒト肥満細胞からのサイトカイン産生機構に関する研究

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05454285
• 研究機関: 信州大学
• 研究代表者: 中畑 龍俊 信州大学, 医学部, 助教授 (20110744)
• 研究分担者: 津野 隆久 信州大学, 医学部, 助手 (10242695) ; 小池 健一 信州大学, 医学部, 助教授 (40143979)
• キーワード: マウス肥満細胞 / ヒト肥満細胞 / サイトカイン産生 / BMMC / 肥満細胞の大量培養 / インターロイキン-3(IL-3) / stem cell factor(SCF) / CD34^+細胞

研究概要

マウス骨髄細胞、脾細胞をIL-3を含む半固形培地中で培養すると種々のコロニーとともに多数の肥満細胞コロニーが形成された。1個の肥満細胞コロニーを釣り上げて、IL-3を含む液体培地に移し培養を続けることにより、比較的容易に単一細胞由来の大量の培養肥満細胞(BMMC)を得ることができるようになった。IL-3依存性のBMMCの増殖はIL-4,IL-10,stem cell factor(SCF)により相乗的に支持されることが明らかとなった。
このようにして得られたBMMCはFcεRIの架橋により、脱顆粒するとともに、TNF,GM-CSF,IL-4を産生することが示された。
ヒト肥満細胞の大量培養系は確立していなかったが、われわれはヒト臍帯血、骨髄より分離したCD34^+細胞をSCF存在下で液体培養することにより、ヒト肥満細胞の大量培養系を確立した。このCD34^+細胞からのSCF依存性の肥満細胞の産生は、初期を除きIL-3,GM-CSFにより著明に抑制され、IL-6,IL-11により促進された。臍帯血CD34+細胞をSCF、IL-6存在下で培養すると、増殖してくる細胞中に占める肥満細胞の比率は培養60日後にはほぼ80%に達し、培養100日以上経過するとほぼ100%となった。このようにして得られたヒモ培養肥満細胞は培養一年以上経過してもなお増殖力を保持している。
最近、純化ヒト培養肥満細胞が大量に得られつつあるので、この細胞を用いてヒト肥満細胞もマウスと同様にサイトカインを産生できるかどうか検討を開始している。

研究成果

• [文献書誌] Ishiguro A.: "Improvement of neutropenia and neutrophil dysfunction by granulocyte colony-stimulating factor in a patient with glycogen storage disease type Ib." Eur.J.Pediatr.152. 18-20 (1993)
• [文献書誌] Siohara M.: "Synergism of interferon-γ and stem cell factor on development of murine hematopoietic progenitors in serum-free culture." Blood. 81. 1435-1441 (1993)
• [文献書誌] Seki T.: "Cell-mediated immune-pancytopenia complicating primary Sjogren's syndrome." Am.J.Hematol.43. 221-225 (1993)
• [文献書誌] Sawayanagi M.: "Hypercalcemia associated with all-trans-retinoic acid in the treatment of acute promyelocytic leukemia." Leukemia Res.17. 441-443 (1993)
• [文献書誌] Shiohara M.: "Possible role of SCF as a serum factor:Monoclonal anti-c-kit antibody abrogates IL-6-dependent colony growth in serum-containing culture." Exp.Hematol.21. 907-912 (1993)
• [文献書誌] Kubo T.: "Different responses of human marrow and circulating erythroid progenitors to stem cell factor,interleukin-3 and granulocyte/macrophage colony stimulating factor." Int.Hematol.58. 153-162 (1993)
• [文献書誌] Amano Y.: "Stem cell factor enhances the growth of primitive erythroid progenitors to a greater extent than interleukin-3 in patients with aplastic anaemia." Brit.J.Haematol.85. 663-669 (1993)
• [文献書誌] Kitahara H.: "Malignant paraganglioma presenting Cushing's syndrome with virilism in childhood:Production of cortisol,androgens and adrenocorticotrophic hormone by the tumor." Cancer. 72. 3340-3345 (1993)
• [文献書誌] Imai T.: "Stem cell factor promotes proliferation of human primitive megakaryocytic progenitors,but not megakaryocytic maturation." Int.J.Hematol.59. 91-98 (1994)
• [文献書誌] Nakazawa T.: "Beneficial effect of G-CSF in an infant with Pasteurella Multocida brain abscess." Eur.J.Pediatr.(in press).
• [文献書誌] Nakahata T.: "Cell surface antigen expressions human erythroid progenitors:erythroid and megakaryocytic markers." Leukemia and Lymphoma. (in press).
• [文献書誌] 中畑龍俊: "骨髄移植後のサイトカインの産生とその意義." 医学のあゆみ. 164. 764-768 (1993)
• [文献書誌] 石黒精: "ダニRAST陽性の気管支喘息児におけるダニ抗原刺激によcolony-stimulating activityの過剰産生." 日本臨床免疫学会誌. 16. 20-26 (1993)
• [文献書誌] 中畑龍俊: "造血とstem cell factor/c-kit." 実験医学. 11. 48-53 (1993)
• [文献書誌] 中畑龍俊: "骨髄移植後のサイトカインの産生とその意義." 医学のあゆみ. 164. 764-768 (1993)
• [文献書誌] 中畑龍俊: "造血抑制因子." Pharma Medica. 11. 73-78 (1993)
• [文献書誌] 小池健一: "造血幹細胞と顆粒球産生-疾患との関係." 臨床血液. 34. 557-561 (1993)
• [文献書誌] 中畑龍俊: "サイトカインの造血幹細胞増幅とmobilizationへの応用." 生体防御. 10. 31-40 (1993)
• [文献書誌] 中畑龍俊: "白血球、マクロファージ機能検査、好塩基球および肥満細胞." Medical Technology. 21. 615-617 (1993)
• [文献書誌] 中畑龍俊: "サイトカインの白血球および血小板造血効果." 最新医学. 48. 1034-1042 (1993)
• [文献書誌] 塩原正明: "増悪期にinterferon-γ産生の著明な亢進が見られたhemophagocytic syndromeの1例." 臨床血液. 34. 1573-1577 (1993)
• [文献書誌] 久保徹夫: "臍帯血:この未知なるもの." 造血因子. 4. 428-431 (1993)
• [文献書誌] 中畑龍俊: "Annual Review免疫1993" 中外医学社、東京, 85-94 (1993)
• [文献書誌] 中畑龍俊: "喘息'93" メジカルビュー社、東京, 29-37 (1993)
• [文献書誌] 中畑龍俊: "肥満細胞の新しい側面とアレルギー性疾患治療" Excerpta Medica、東京, 71-87 (1993)
• [文献書誌] Tsuji K.: "Current Topics in Mucosal Immunology 1993" Elsevier Science Publishers, 419-424 (1994)