リソソーム病における遺伝子治療の有効性に関する研究-モデルマウスを用いて-

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05454289
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 岡田 伸太郎 大阪大学, 医学部, 教授 (30028609)
• 研究分担者: 福島 久雄 大阪大学, 医学部, 助手 (70199214) ; 乾 幸治 大阪大学, 医学部, 講師 (90175208)
• キーワード: ガラクトセレブロシダーゼ / クローニング / twit cher mouse / 遺伝子治療

研究概要

クラッベ病の原因酵素であるヒトガラクトセレブロシダーゼを、ヒトリンパ球より各種疎水性カラム.TSKG3000SWを用いて22650倍に精製した。精製酵素のN端.内部アミノ酸情報よりオリゴヌクレオチドのプライマーを合成し、PCR法にて、cDNA断片を得、ヒト胎盤λgtリライブラリーをスクリーニングし4種のクローンを得、完全長ヒトガラクトシルセレブロシダーゼcDNAを単離した。cDNAは3780塩基からなり、669個のアミノ酸をコードし、N端には26個のシグナルペプチド、6箇所のアスパラギン糖鎖結合部位が存在することが判明した。このcDNAをpSUL発現ベクターに組み込みCos細胞に遺伝子導入し活性発現を確認した。またモデルマウスの遺伝子治療を行なうためマウスの完全長cDNAを得ることに成功した。

研究成果

• [文献書誌] Tajiri H.et al.: "Immunoglobulin-complexed asparate aminotransferase...." J.Clin.Lab.Immunol.38. 41-49 (1993)
• [文献書誌] Yamamoto,T.et al.: "Bone marrow-derived osteoclast-like cells...." J.Clin.Invest.91. 362-367 (1993)
• [文献書誌] Tsukamoto,H.et al.: "Different clinical feateeres in...." Clin.Genet.43. 139-142 (1993)
• [文献書誌] Tsukamoto,H.et al.: "Case of ring chromosome 7;...." Am.J.Med.Genet.46. 632-635 (1993)
• [文献書誌] Kawa-Ha,K.et al.: "Isolation of human herpesvirus 7 from a child..." British J.Haemotology. 84. 545-548 (1993)
• [文献書誌] Sakai,et al.: "Krabbe disease:isolation and characterization..." Biochem.Biophys.Res.Commun.(in Press). (1994)
• [文献書誌] 岡田伸太郎: "医学の進歩と社会,脳と発達" 診断と治療社, 1 (1993)
• [文献書誌] 乾幸治: "肝型グリコーゲン病の分子遺伝学,日本臨床" 日本臨床社, 5 (1993)