新たに単離した転座関連遺伝子の血液細胞の分化,増殖における役割

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05454337
• 研究機関: 愛知県がんセンター
• 研究代表者: 上田 龍三 愛知県がんセンター研究所, 化学療法部, 部長 (20142169)
• 研究分担者: 小幡 裕一 愛知県がんセンター研究所, 免疫部, 室長 (30177290) ; 小椋 美知則 愛知県がんセンター研究所, 研究員 (40231229) ; 山本 一仁 愛知県がんセンター研究所, 化学療法部, 研究員 (60250247)
• キーワード: 造血器腫瘍 / 染色体転座 / RCK遺伝子 / MLL遺伝子 / PRADI遺伝子 / BCL-1遺伝子 / マントル層リンパ腫 / 二次性白血病

研究概要

造血器腫瘍では染色体異常、特に染色体転座が多く認められ、病型や病態との相関が強く認められる。これら染色体転座の結果、活性化される遺伝子やその遺伝子異常の研究は発癌機構の解明、並びに臨床診断に直接つながる可能性が高い。染色体11番長腕(11q)には転座が高頻度に認められる領域が2ケ所存在する。マントル層リンパ腫に認められるt(11;14)転座の11q13領域と、多様な病型と多様な染色体が転座する11q23領域である。11q13領域はBCL-1転座切断点として知られていたが遺伝子の本態は不明であった。近年、BCL-1切断点より約130kb以内に細胞回転を制御するcyclin D1をコドするPRAD1遺伝子が位置する事が報告された。申請者らは、t(11;14)転座培養株には全てPRAD1遺伝子のmRNAレベルの過剰発現を見いだした。更に、11q13領域と免疫グロブリンlambda鎖遺伝子との転座症例(variant型)を解析した結果、転座切断点はPRAD1遺伝子の3′側にある事が示された。通常の免疫グロブリン重鎖との転座は5′側に存在し、両型の転座切断点で規定される遺伝子はPRAD1遺伝子のみである。即ち、PRAD1遺伝子がBCL-1遺伝子である事を確定できた。更に、リコンビナントPRAD1遺伝子産物にて作成した5D4モノクローナル抗体はパラフィン包埋組織でも免疫染色が可能であり、病理組織学的検索に応用の道が拓けた。
更に、乳児白血病、治療関連二次性白血病、リンパ腫等でみとめられる11q23領域からは、先ずt(11;14)を持つBリンパ腫株の切断点よりRCK遺伝子を単離した。解析の結果、翻訳開始因子eIF4Aと相同性を示す蛋白をコードしていた。次いで、t(4;11),t(9;11),t(11;19)等の転座の11q23領域から、原因遺伝子MLLを単離解析した。さらに、転座によりLTG4,9,19とキメラ蛋白が形成される事を明かにした。キメラmRNAを高感度で検出する条件の設定に成功し、病期のモニタリングなどの臨床応用が可能となった。現在、リコンビナント遺伝子産物に対する抗体の作製、またキメラ遺伝子を構築し細胞株に導入して機能を解析中である。

研究成果

• [文献書誌] Emi,N.: "Isolation of a novel cDNA clone showing a marked similarity to ME491/CD63 superfamily." Immnogenetic. 37. 193-198 (1993)
• [文献書誌] Matsuda,R.: "Expression of the c-kit protein in human solid tumors and incorresponding fetal and adult normal tissues." Amer.J.Pathol.142. 339-346 (1993)
• [文献書誌] Yamamoto,K.: "Gene rearrangement and truncated mRNA in cell lines with 11q23 translocation." Oncogene. 8. 479-485 (1993)
• [文献書誌] Kagami,Y.: "Novel interleukin-2 dependent T-cell line derived from adultT-cell leukemia not associated with human T-cell leukemia virus type I." Jpn.J.Cancer Res.84. 371-378 (1993)
• [文献書誌] Iida,S.: "Molecular cloning of 19p13 breakpoint region in intanfile leukemia with t(11;19)(q23;p13)translocation." Jpn.J.Cancer Re.84. 532-537 (1993)
• [文献書誌] Yamamoto,K.: "Two distinct portions of LTG19/ENL at 19p13 are involved in t(11;19)leukemia." Oncogene. 8. 2617-2625 (1993)
• [文献書誌] Iida,S.: "MLLT3 gene on 9p22 involved in t(9;11)leukemia encodes a serine/proline rich protein homologous to MLLT1 on 19p13." Oncogene. 8. 3085-3092 (1993)
• [文献書誌] Komatsu,H.: "Overexpression of PRAD1 in a mantle zone lymphoma patient with a t(11;22)(q13;q11)translocation." Br.J.Haematol.85. 427-429 (1993)
• [文献書誌] Akao,Y.: "Long-range mapping of the 11q23 region involved in chromosome aberrations in human tumors by pulsed-field gel electrophoresis with a Yeast artificial chromosome." Genes Chrom.Cancer. 8. 167-171 (1993)
• [文献書誌] Chen,P-M.: "Rearrangement of bcl-2 genes in malignant lymphomas in Chinese patients." Cancer. 72. 3701-3706 (1993)
• [文献書誌] Akiyama,N.: "Messenger RNA levels of five genes located at chromosome 11q13 in B-cell tumors with chromosome translocation t(11;14)(q13;q32)." Cancer Res.54. 377-379 (1994)
• [文献書誌] Inazawa,J.: "The 11q23 breakpoint in a patient with primary myelodysplastic syndrome located proximal to the MLL/ALL-1 gene." Genes Chrom.Cancer. (in press). (1994)
• [文献書誌] Yamamoto,K.: "A reverse-transcriptase-polymerase chain reaction detects heterogeneous chimeric mRNAs in leukemias with 11q23 abnormalities." Blood. (in press). (1994)