前立腺肥大症の発育および症状発現に関する前立腺間質の役割

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05454432
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 森山 信男 東京大学, 医学部(病), 講師 (80143501)
• 研究分担者: 栗本 重陽 東京大学, 医学部(分), 助手 (30225271) ; 堀江 重郎 国立がんセンター中央病院, 医師 (40190243)
• キーワード: ヒト前立腺組織 / 前立腺肥大症 / α_1-アドレナリン受容体 / RNAase protection assay / in situ Hybridization

研究概要

本年度はヒト前立腺組織におけるα_1アドレナリン受容体サブタイプ(1a,1b,1d)の発現量をRNase protection assay法で、また局在をin situ hybridization法で検討し、臨床病理学的事項との相関を検討した。
【症例】前立腺摘出術を施工した前立腺肥大症例12例(年齢±S.D.;68.7±7.6歳、前立腺重量;27gから100g)より、標本の採取を行った。また、膀胱腫瘍で、明らかな前立腺肥大症の無い症例4例(年齢±S.D.;61.3±9.56歳)の前立腺組織(非肥大前立腺組織)も採取した。標本は直ちに、またはOCTコンパウンドに包埋して、液体窒素にて凍結後、実験に使用するまで-130℃に保存した。
【方法】mRNAの定量実験には、α_1-アドレナリン受容体サブタイプについて、相同性の少ないC末端領域のDNA(それぞれ約300bp)をRNA転写用ベクターに組み込み、これを用いて[α-^<32>P]UTPで標識されたアンチセンスRNAプローブを作製した。このプローブを用い、ヒト肥大前立腺組織ならびに非肥大前立腺組織から調製したpoly(A+)RNAのRNase protection assayを行った。mRNAの局在は、同じくC末端領域からdigoxigeninラベルのRNAプローブを作製し、10μmの凍結切片でin situ hybridizationで行い、digoxigenin-ELISA法にて検出した。
【結果ならびにまとめ】ヒト肥大前立腺組織におけるアドレナリン受容体サブタイプはα_<1a>が優位であり、α_<1a>(85%)>α_<1d>(15%)≫α_<1b>(ほとんど検出されない)の順に発現していた。しかし、前立腺重量ならびに年齢との相関は現在のところ認めていない。局在はα_<1a>、α_<1d>とも主に間質の筋組織に主に見られた。α_<1a>とα_<1d>の結合部位はこれら筋細胞では部位的差異ははっきりしない。また、非肥大前立腺組織ではα_<1a>(63%)>α_<1d>(29%)≫α_<1b>(8%)であった。全α_1mRNAの量は肥大前立腺組織が非肥大前立腺組織に比べて6倍であり、各サブタイプでは肥大前立腺組織の方がα_<1a>mRNA量で8倍、α_<1d>mRNA量で3倍で多く認められた。

研究成果

• [文献書誌] Moriyama,N.et al.: "Renal aging change of alpha 1-adrenoceptor in Wistar rat." General Pharmacology. 26. 347-351 (1995)
• [文献書誌] Moriyama,N.et al.: "Effect of bunazosin,α_1-adrenおoeptor blocker,on multidirectional contractile response and localization of bunazosin binding sites in human hypertrophied prostate." General Pharmacology. 26. 1033-1037 (1995)
• [文献書誌] Kurimoto,S.,Moriyama,N.et al.: "Quantitative autoradiography of α_1-adrenoceptors with ^3H tamusulosin in human hypertrophied prostate using computerized image analysis." Histochemical Journal. 27. 1007-1013 (1995)
• [文献書誌] Moriyama,N.et al.: "Decreased contractile effect of endothelin-1 on hyperplastic prostate." General Pharmacology. (in press).
• [文献書誌] Moriyama,N.et al.: "Detection of α_1-adrenoceptor subtypes in human hypertrophied prostate by in situ hybridization." Histochemical Journal. (in press).