網膜色素変性症における光受容細胞特異的レチノール脱水素酵素遺伝子の解析

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05454467
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 石黒 誠一 東北大学, 医学部, 講師 (20111271)
• 研究分担者: 玉井 信 東北大学, 医学部, 教授 (90004720)
• キーワード: レチノール脱水素酵素 / cDNA / 一次構造 / 遺伝子 / 視細胞 / 網膜色素変性症

研究概要

我々は、網膜色素変性症の原因を解明するために、視サイクルの中で特に視細胞に特異的なレチノール脱水素酵素の働きに注目し、ビタミンA代謝の鍵酵素である視細胞特異的レチノール脱水素酵素を精製し、抗体を作成し、この抗体を利用してcDNAを単離し、その構造解析を行ってきた。その結果、(1)精製したレチノール脱水素酵素のN末端から一部の一次構造を決定、(2)ウシ網膜cDNAライブラリーからラット抗ウシレチノール脱水素酵素を用いてレチノール脱水素酵素のcDNAを単離、(3)単離したレチノール脱水素酵素cDNAの塩基配列の決定を終了し、1017個の塩基配列を持つことが判明した。
我々は分離したこのcDNAのレチノール脱水素酵素活性を検討するため、動物細胞用ベクターpSVLにこのcDNAを組み込み、COS7細胞に導入したが、活性の測定ができなかった。大量に材料を得るために、CHO細胞に導入して安定にレチノール脱水素酵素を発現する細胞を得たが、まだクローニングの最中で活性の測定が終わっていない。

研究成果

• [文献書誌] Toshiaki Abe: "Glutamate dehydrozenase isoenzyms in the bovine retina and human leukocyte." Jpn.J.Ophthalmol.38. 16-23 (1994)
• [文献書誌] Shinpei Nishikawa: "A transient expression of αβ crystalline in the developing rat retinal pigment epithelium." Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.35. 4159-4164 (1994)
• [文献書誌] Yoko Noro: "Accumulation of glutamate-like immunoreactivity in the rds/rds mouse retinas." Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.35. 1362 (1994)
• [文献書誌] Akira Ishikawa: "Accumulation of GABA in diabetic rat retinal Muller cells." Invest.Ophthalmol Vis Sci.35. 1587 (1994)
• [文献書誌] Keiichi Kato: "Partial purification of a novel endogenous growth factor to embryonic chick retinal pigment epithelial cells from bovine retina." Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.35. 1760 (1994)
• [文献書誌] Hiroki Watanabe: "Suppression of phosphate-actirated glutaminase activity in the ischemic rat retinas." Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.35. 1866 (1994)
• [文献書誌] 石黒誠一: "眼科学大系,5A網膜硝子体,視細胞の情報伝達" 中山書店, 6 (1994)