血栓形成阻止因子の特異機能発現における分子内機能ドメインの役割の解明-構造・機能相関に関する分子生物学的解析-

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05454622
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 鈴木 宏治 三重大学, 医学部, 教授 (70077808)
• 研究分担者: 林 辰弥 三重大学, 医学部, 助手 (00242959) ; 武谷 浩之 三重大学, 医学部, 助手 (60222105)
• キーワード: プロテインS / プロテインC / 血栓形成阻止 / 機能ドメイン / EGFドメイン / 組換え蛋白質 / 分子間相互作用 / プロテインC凝固制御系

研究概要

生命の維持・進展に不可欠な血液の流動性は、プロテインC凝固制御系因子(プロテインC、プロテインSなど)やアンチトロンビンIIIなどの抗血栓性因子の産生や活性化によって維持されており、それらの因子の先天性異常症は高頻度に血栓症を招来する。本研究課題においては、昨年度に続き、プロテインSの抗血栓性機能の特異的発現における分子内構成ドメインの役割について、以下の研究を行った。
(1)先天性プロテインS異常症(ProteinS-Tokushima)由来の変異プロテインS(Lys^<155>→Glu)の組換え蛋白質を作製し、構造変異と機能異常の関係を解析した。その結果、プロテインSの第2EGFドメインのLys^<155>を含む領域が活性化プロテインC(APC)および凝固第Xa因子の結合部位として重要なことが明らかになった。
(2)ラットプロテインSのcDNAクローニングを行い、ラットプロテインSと他種動物のプロテインSの構造比較を行い、プロテインS分子上のトロンビン感受性ドメインと第1EGFドメインを含む領域が、プロテインSのAPCに対する種特異的を決定していることを示唆していた。
(3)ヒトプロテインSの抗血栓作用発現機構を、プロテインSと関連の血漿蛋白質(APC、第V因子、第Xa因子、C4BPなど)の相互作用の面から解析し、プロテインS分子への各因子の親和性と両因子間の相互作用部位を推定した。
以上の研究成果は、プロテインSを中心とする抗血栓作用の分子機構ならびに蛋白質全般における分子内機能ドメインの役割の理解に重要な知見与えるものと考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Yasuda,H.,Hayashi,T.,Nishioka,J.and Suzuki,K.: "Molecular cloning and functional characterization of rat plasma protein S." J.Biochem.117. 374-383 (1995)
• [文献書誌] Ogawa,H.,Ido,M.and Suzuki,K.: "The thrombin receptor transmits signals through a 33-kDa protein kinase in human platelets." Biochem.Biophys.Res.Commun.203. 907-913 (1994)
• [文献書誌] Taneda,H.,Andoh,K.,Suzuki,K.,et al.: "Blood coagulation factor Xa interacts with a linear sequence of the kringle 2 domain of prothrombin." J.Biochem.116. 589-597 (1994)
• [文献書誌] Iino.M.,Takeya,H.,Suzuki,K.,et al.: "The role of human factor X activation peptide in activation of factor X by factor IXa." J.Biochem.116. 335-340 (1994)
• [文献書誌] Ohiwa,M.,Hayashi,T.,Suzuki,K.,et al.: "Factor VII Mie:homozygous asymptomatic type I deficiency caused by an amino acid substitution of His(CAC)for Arg(247)(CGC)in the catalytic domain." Thromb.Haemostas.71. 773-777 (1994)
• [文献書誌] Hayashi,T.,Nishioka,J.,Suzuki,K.,et al.: "Protein S Tokushima:abnormal molecule with a substitution of Glu for Lys-155in the second epidermal growth factor-like domain of protein S." Blood. 83. 683-690 (1994)
• [文献書誌] Suzuki,K.: "Molecular Bilogy of Thrombosis and Hemostasis,(Protein C.)" Marcel Dekker,Inc,New York(eds.by Roberts,H.R.and High,K.A.), 688(32) (1995)
• [文献書誌] Suzuki,K.: "Molecular Bilogy of Thrombosis and Hemostasis,(Protein S.)" Marcel Dekker,Inc,New York(eds.by Roberts,H.R.and High,K.A.), 688(20) (1995)