肝細胞増殖因子の活性化に関与する新規セリンプロテアーゼの構造と機能の解析

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05454625
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 喜多村 直実 関西医科大学, 医学部, 教授 (80107424)
• 研究分担者: 宮澤 恵二 関西医科大学, 医学部, 講師 (40209896)
• キーワード: 肝細胞増殖因子 / HGF activator / プロセシング / 肝障害

研究概要

肝細胞増殖因子(HGF)は、肝細胞の増殖を促進する蛋白性因子であり、肝障害後の肝再生に重要な役割を果たすと考えられている。HGFは一本鎖前駆体として生成・分泌後、細胞外においてプロセシングされヘテロダイマー構造に変換し活性化される。我々は、一本鎖HGFをヘテロダイマーに変換する活性を有する新規のセリンプロテアーゼをヒト血清より精製し、HGF activatorと名付けた。本研究では、肝障害に応答したHGFの活性化にHGF activatorがいかに機能するかについて解析し以下の知見を得た。
1.四塩化炭素により障害を惹起した肝臓のホモジェネートには、HGFを活性化する酵素活性が誘導される。この酵素活性がHGF activatorに由来するか否かについてHGF activatorの活性を中和する特異的抗体を用いて検討したところ、障害肝ホモジェネート中の活性がこの中和抗体でほとんど阻害された。したがってHGF activatorは、障害肝においてHGFを活性化する酵素として機能することが明らかになった。
2.HGF activatorの不活性型と活性型の性質について検討したところ、HGF activatorは活性化に伴ってヘパリン結合性が強くなるという性質をもっていた。したがってHGF activatorは不活性前駆体として血液中を循環しているが、組織障害時には局所的に活性化し、活性化したHGF activatorは細胞表面のマトリックスへの結合により近傍に固定され、局所的にHGFを活性化する機能を果たしていると考えられる。
3.四塩化炭素により障害を惹起した肝臓のHGF activator mRNAの発現について解析したところ、障害に伴ってmRNAの発現が誘導された。したがってHGF activatorは組織障害に応答してその産生量が増加し、HGFの活性化に機能すると考えられる。

研究成果

• [文献書誌] K.Miyazawa: "Proteolytic activation of hepatocyte growth factor in response to tissue injury." J.Biol.Chem.269. 8966-8970 (1994)
• [文献書誌] M.Komada: "Regulatory role of major tyrosine autophosphorylation site of kinase domin of c-Met receptor (scatter factor/hepatocyte growth factor receptor)." J.Biol.Chem.269. 16131-16136 (1994)
• [文献書誌] S.Shibamoto: "Tyrosine phosphorylation of β-catenin and plakoglobin enhanced by hepatocyte growth factor and epidermal growth factor in human carcinoma cells." Cell Adhesion Commun.1. 295-305 (1994)
• [文献書誌] S.Shibamoto: "Association of p120,a tyrosine kinase substrate,with E-cadherin/catenin complexes." J.Chell Biol.(in press). (1995)
• [文献書誌] Y.Uehara: "Placental defect and embryonic lethality in mice lacking hepatocyte growth factor/scatter factor." Nature. (in press). (1995)
• [文献書誌] T.Shimomura: "Activation of hepatocyte growth factor by two homologous proteases:blood coagulaion factor XIIa and hepatocyte growth factor activator." Eur.J.Biochem.(in press). (1995)