| 研究概要 |
タンパク質の分泌経路において,オルガネラ間の小胞輸送におけるタンパク質の選別には,小胞のダイナミックな動きが重要である.つまり,小胞体タンパク質についていえば,その小胞体への局在は,小胞体を出ないという静的残留と,いったんゴルジ体にまで輸送されたのち小胞体に送り返されるという動的逆送の2つのメカニズムが働いている.われわれは,酵母の小胞体-ゴルジ体間輸送に必須な膜タンパク質であるSec12pが,見かけ上は小胞体のみに局在しているにもかかわらずゴルジ体のcis領域における糖鎖修飾を受けることから,両オルガネラ間をすみやかにリサイクルしながら機能していることを提唱してきた.これまでに,Sec12pを誤ってtransゴルジ以降に輸送してしまう酵母変異株rer1とrer2の分離とその相補遺伝子の単離に成功している.RER1遺伝子は,188アミノ酸残基からなるゴルジ体の内在性膜タンパク質をコードしていた.また,rer1破壊株においてもSec12pは依然として大部分が小胞体に局在しており,静的残留のメカニズムは損傷を受けていないことが示唆された.以上のことから,Rer1pはゴルジ体において,誤って輸送されてきたSec12pを小胞体に逆送する役割を果たしていると結論した.一方で,Sec12pの側に存在する小胞体局在化シグナルを同定する試みを行った.液胞膜タンパク質であるDap2pとのキメラを作製し、生化学的,形態学的な詳細な解析を行った結果,膜貫通ドメインがRer1p依存性の主に逆送のシグナル,N末端側の細胞質ドメインがRer1p非依存性の残留のシグナルであるらしいことを明らかにした.
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