アポトーシスによる中枢神経細胞死に伴う細胞内分子機構の解析

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05454666
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 畠中 寛 大阪大学, 蛋白質研究所, 教授 (60208519)
• 研究分担者: 池内 俊彦 大阪大学, 蛋白質研究所, 助手 (20093362)
• キーワード: 蛋白質合成阻害剤 / 神経栄養因子 / アポトーシス / 細胞生存維持 / 神経細胞死 / 酸素ラジカル

研究概要

ラットの未分化ニューロンではインキュベータ内の50%気相酸素濃度の培養で細胞死が起こる、この死はアポトーシスの形態をとることを明らかにした。即ち、高酸素によるニューロン死は蛋白質合成阻害剤であるシクロヘキシミドによっても顕著に防がれることなどを観察した。新たな遺伝子、蛋白質の発現を死が要求していることが明らかとなったので、アポトーシスによって誘導される遺伝子の探索を行った。まず、ラット胎仔20日齢の新皮質ニューロンを用い、培養時のインキュベータ内の酸素濃度を50%にし、6時間培養した後、ニューロンからmRNAを抽出し、そのcDNAを作製した。これと通常気相で培養したニューロンのものとでディファレンシャルハイブリダイゼーションを行い、高酸素に伴うアポトーシスによる死によってニューロン内に誘導される2種の遺伝子を単離した。現在この遺伝子が実際にアポトーシスに関連したものか否かを調べている。

研究成果

• [文献書誌] Y.Enokido,& H.Hatanaka: "Apoptotic cell death occurs in hippocampal neurons cultured in a high oxygen atmosphere." Neurosci.,. 57. 965-972 (1993)
• [文献書誌] Y.Akaneya,Y.Enokido,M.Takahashi & H.Hatanaka: "In vitro model of hypoxia:Basic fibroblast growth factor can rescue cultured CNS neurons from oxygen-deprived cell death." J.Cereb.Blood Flow Metab.,. 13. 1029-1032 (1993)
• [文献書誌] Y.Akaneya,M.Takahashi,H.Tsukui & H.Hatanaka: "Enhancement of choline acetyltransferase activity in coculture of rat septal and hippocampal neurons." Brain Res.,. (印刷中). (1994)
• [文献書誌] M.Yamada & H.Hatanaka: "Interleukin-6 protects cultured rat hippocampal neurons against glutamate-induced cell death." Brain Res.,. (印刷中). (1994)
• [文献書誌] Y.Akaneya,M.Takahashi & H.Hatanaka: "Death of cultured postnatal rat CNS neurons by in vitro hypoxia with special reference to N-methyl-D-aspartate-related toxicity." Neurosci.Res.,. (印刷中). (1994)
• [文献書誌] M.Kojima,T.Ikeuchi & H.Hatanaka: "Nerve growth factor induces trkA mRNA expression in cultured basal forebrain cholinergic neurons from 17-day fetal rats." Neurosci.Lett.,. (印刷中). (1994)
• [文献書誌] Y.Enokido,T.Yonemasu,T.Kubo,M.Ichikawa & H.Hatanaka: "“Recent Developments of Alzheimer's and Parkinson's Diseases"eds by I.Hanin,M.Yoshida and A.Fisher,Plenum Press" Oxygen toxicity induces apoptotic neuronal in cultured rat hippocampal neurons.(印刷中), (1994)