1993 年度実績報告書

遺伝子制御にもとづくテンサイの機能開発に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号	05556001
研究機関	北海道大学
研究代表者	三上哲夫北海道大学, 農学部, 教授 (50133715)
研究分担者	高牟禮逸朗北海道大学, 農学部, 助手 (90179557) 内藤哲北海道大学, 農学部, 助教授 (20164105) 谷田昌稔北海道グリーンバイオ研究所, 研究部長
キーワード	テンサイ / 形質転換 / アグロバクテリウム / Tiプラスミド / プロテアーゼインヒビター / 除草剤耐性 / GUS遺伝子 / ハイグロマイシン抵抗性
研究概要	本研究の目的は、テンサイにおいて効率的で普遍的な形質転換システムを開発し、有用遺伝子の計画的導入を中心とするテンサイ分子・細胞育種技術の確立を図ることである。本年度の研究実績は次のように要約される。テンサイの葉片培養系を用いてアグロバクテリウムによる形質転換を試みた。ベクターには選抜マーカーとしてハイグロマイシン抵抗性遺伝子、レポーター遺伝子としてGUS遺伝子が組込まれている。25個の外植片から8個のハイグロマイシン抵抗性シュートが選抜された。これらの抵抗性シュートのうち、6個のシュートにおいてはGUS活性が認められたので、さらにDNA解析を試みた。植物染色体へのT-DNAの組込みが成功していれば、挿入ベクター配列を鋳型にして、GUS遺伝子領域がPCRにより増幅される筈である。ハイグロマイシン抵抗性シュートより抽出したDNAについてはそのすべてにおいて、期待されるPCR産物が見出された。またゲノミックサザンハイブリダイゼーションによりGUS遺伝子がテンサイハプロイドゲノム当り、1〜3コピー存在することが示された(コピー数は抵抗性シュートにより異なる)。病虫害抵抗性遺伝子として有望なプロテアーゼインヒビター遺伝子についてはTiプラスミドへの連結も完了し、形質転換実験に備えている。また除草剤耐性遺伝子の構造改変も進展中である。今後は形質転換効率のより高いテンサイ品種とアグロバクテリウム系統との組合せを選ぶとともに、得られたハイグロマイシン抵抗性シュートについては隔離温室にて開花採種を試み、導入遺伝子の遺伝を調査する予定である。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Senda,M.: "The sugar beet mitochondrial gene for the ATPase alpha-subunit:sequence,transcription and rearrangements in cytoplasmic male sterile plants." Curr.Genet.24. 164-170 (1993)
[文献書誌] Satoh,Y.: "The use of mitochondrial DNA polymorphism in the classification of individual onion plants by cytoplasmic genotypes." Theor.Appl.Genet.86. 345-348 (1993)
[文献書誌] Kato,S.: "Cytoplasmic relatedness of apple landraces and cultivars:a molecular analysis." Euphytica. 66. 99-102 (1993)
[文献書誌] Kubo,T.: "The sugar beet mitochondrial genome contains an ORF sharing sequence homology with the gene for the 30 kDa subunit of bovine mitochondrial complex I." Mol.Gen.Genet.241. 479-482 (1993)
[文献書誌] Kato,S.: "Mitochondrial DNA restriction fragment length polymorphisms in Malus species." Plant Breed.11. 162-165 (1993)
[文献書誌] Naito,M.: "Expression of a soybean(Glycine max[L.]Mcrr.) seed storage protein gene in transgenic Arabidopsis thaliana and its response to nutiitional stress and to abscisic acid mutations." Plant Physiol.(in press). (1994)

1993 年度 実績報告書

遺伝子制御にもとづくテンサイの機能開発に関する研究

研究代表者

三上 哲夫 北海道大学, 農学部, 教授 (50133715)

研究成果

[文献書誌] Senda,M.: "The sugar beet mitochondrial gene for the ATPase alpha-subunit:sequence,transcription and rearrangements in cytoplasmic male sterile plants." Curr.Genet.24. 164-170 (1993)

[文献書誌] Satoh,Y.: "The use of mitochondrial DNA polymorphism in the classification of individual onion plants by cytoplasmic genotypes." Theor.Appl.Genet.86. 345-348 (1993)

[文献書誌] Kato,S.: "Cytoplasmic relatedness of apple landraces and cultivars:a molecular analysis." Euphytica. 66. 99-102 (1993)

[文献書誌] Kubo,T.: "The sugar beet mitochondrial genome contains an ORF sharing sequence homology with the gene for the 30 kDa subunit of bovine mitochondrial complex I." Mol.Gen.Genet.241. 479-482 (1993)

[文献書誌] Kato,S.: "Mitochondrial DNA restriction fragment length polymorphisms in Malus species." Plant Breed.11. 162-165 (1993)

[文献書誌] Naito,M.: "Expression of a soybean(Glycine max[L.]Mcrr.) seed storage protein gene in transgenic Arabidopsis thaliana and its response to nutiitional stress and to abscisic acid mutations." Plant Physiol.(in press). (1994)

1993 年度実績報告書

三上哲夫北海道大学, 農学部, 教授 (50133715)