サーファクタント蛋白質SP-A,SP-Dの血清検査法及び呼吸器疾患への臨床応用

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05557035
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 秋野 豊明 札幌医科大学, 医学部, 教授 (80045377)
• 研究分担者: 長田 篤雄 ヤマ醤油(株), 診断部・免疫研究室, 室長 (00129157) ; 細田 健治 帝人(株), 医療診断研究所, 主任研究員 ; 本田 泰人 札幌医科大学, 医学部, 講師 (70190270) ; 阿部 庄作 札幌医科大学, 医学部, 教授 (60113510) ; 黒木 由夫 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (70161784)
• キーワード: 肺サーファクタント / サーファクタント・アポ蛋白質 / 血清検査法 / 特発性間質性肺炎 / びまん性肺疾患 / SP-A / SP-D / 免疫グロブリン

研究概要

本試験研究は,肺サーファクタント蛋白質SP-A,SP-Dを指標として、各種肺疾患における血清SP-A及びSP-Dの診断的意義を確立することを目的とし、遂行された。平成6年度に得られた成果を要約する。
1.SP-Aの血清検査法を高感度に改良したキットを作製、実用化した。前年度に報告した検査法を、高感度、迅速な測定法に改良、またリコンビナントSP-Aと免疫原性が同一の抗原を標準に使用し、従来報告されたSP-A値を補正した。
2.新SP-A測定キットを用いて測定した血清SP-A濃度の健常者正常値から得たカットオフ値は43.8ng/mlで、これ以上を血清SP-A陽性とした。各種呼吸器疾患中、肺胞蛋白症(PAP),特発性間質性肺炎(IIP)の陽性率は50%以上と高く、特にIIPの急性憎悪期では著しい上昇がみられた。この結果、血清SP-A濃度をIIPの診断基準に加えることを提唱した。
3.SP-D血清検査法の実用化(キット化)が実現した。リコンビナントSP-Dを作製することにより、標準SP-Dの充分な供給が可能になった。健常者正常値から血清SP-D濃度のカットオフ値は136ng/mlで、IIPは91、5%、PAPは87、5%と非常に高い陽性率であった。また、IIPの血清SP-D値は高いが、肺洗浄液(BAL)中のそれは正常値より低濃度であった。また、IIPの血清SP-D値は高いが、肺洗浄液(BAL)中のそれは正常値より低濃度であり、一方、PAPでは血清、BALともに高値なので、両疾患におけるSP-Dの血中出現の機構の違いが示唆された。
4.PAP患者BAL中のSP-Aは、巨大分子構造に変化があり、この型のSP-AはIgGとの結合性を獲得すること、リン脂質膜の格子様構造を形成しないことを示し、SP-Aの構造変化がPAPの病態形成に深く関与していることを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Inoue,T.: "Enzyme-linked immunosorbent assay for human pulmonary surfactant D." J.Immunol.Method. 173. 157-164 (1994)
• [文献書誌] Kuroki.Y.: "Pulmonary surfactant proteins" J.Biol.Chem.269. 25943-25946 (1994)
• [文献書誌] Hiraike,N.: "Eoitope mapping for monoclonal antibody against human surtactart protein A(SP-A)alters receptor binding of SP-A and the SP-A dependent regulation of phospbo lipid ecret on by alveolar type II cells." Biochim.Biophys.Acta. (in press). (1995)
• [文献書誌] 秋野 豊明: "サーファクタントの生化学と今後の臨床展望" 日本未熟児新生児誌. 6. 13-22 (1994)
• [文献書誌] 小笠原由法: "肺サーファクタント蛋白質の構造と機能" The Lipids. 5. 440-447 (1994)
• [文献書誌] 渡辺 智之: "病態肺における肺サーファクタントの変動に関する研究 第1報 N-nitroso-N-methylurethane投与により惹起される急性肺障害-ARDSモデル-" 札幌医学雑誌. 63. 149-159 (1994)
• [文献書誌] 渡辺 智之: "病態肺における肺サーファクタントの変動に関する研究 第2報 気道内silica投与により惹起される慢性肺障害-肺胞蛋白症類似モデル-" 札幌医学雑誌. 63. 161-167 (1994)
• [文献書誌] Honda,Y.: "Aberrant appearance of lung surfactant protein A in sera of patients with idiopathic fibrosis and its clinical significance." Respiration. (in press). (1995)
• [文献書誌] Shijubo,K.: "Lung surfactant protein A and carcinoembryonic antigen in pleural effusions due to lung adenocarcinoma and malignant mesothelioma" Eur.Respir.J.(in press). (1995)
• [文献書誌] Honda,Y.: "Determination of surfactant protein A in sera and bronchoalveolar lavage fluids of patients with pulmonary alveolar proteinosis." Eur.Respir.J.(in press). (1995)
• [文献書誌] Takahashi,H.: "Pulmonary surfactant protein A: a serum marker of pulmonary fibrosis in patients with collagen vascular diseases." Clin.Chim.Acta. (in press). (1995)
• [文献書誌] Honda,Y.: "Pulmonary surfactant protein D in sera and bronchoalveolar fluids" Am.J.Respir.Crit.Care Med.(in press). (1995)
• [文献書誌] 秋野 豊明: "サーファクタントの生化学と展望" 日本界面医学誌. (印刷中). (1995)
• [文献書誌] 阿部 庄作: "各種肺疾患における血清肺サーファクタント蛋白質-Aの臨床的意義" 日本胸部疾患誌. (印刷中). (1995)
• [文献書誌] Kari,M.: "Prenatal dexamethasone and exogenous surfactant therapy-surfactant indices in airway specimens." Am.J.Respir.Crit.Care Med.(in press). (1995)
• [文献書誌] Robertson,B.: "Alveolar-to-vascular leakage of surfactant protein A in ventilated immature newborn rabbits." Biol.Neonate. (in press). (1995)
• [文献書誌] Veldhuizen,R.A.W.: "Pulmonary surfactant subfractions in patients with the acute respiratory distress syndrome(ARDS)." Am.J.Respir.Crit.Care Med.(in press). (1995)