| 研究課題/領域番号 |
05557047
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| 研究機関 | 群馬大学 |
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研究代表者 |
立元 一彦 群馬大学, 内分泌研究所, 教授 (60240694)
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| 研究分担者 |
小島 至 群馬大学, 内分泌研究所, 教授 (60143492)
伊藤 漸 群馬大学, 内分泌研究所, 教授 (00008294)
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| キーワード | ペプチド / ホルモン / 神経ペプチド / アンタゴニスト / アゴニスト / ニューロペプチドY / ガラニン / パンクレアスタチン |
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| 研究概要 |
平成5年度は細胞培養施設を創設するために、バイオクリーンベンチ、インキュベーター、倒立顕微鏡、オートクレーブ、遠心機等を購入し、セットアップを完了した。これで培養細胞を用いる生理活性ペプチドのアッセイが可能になった。そこでまず、HEL細胞を培養して、その細胞内カルシウム濃度の変化を測定することにより、ニューロペプチドYの受容体アンタゴニスト検出法を確立した。また、我々は、ラットの単離膵ラ氏島から調製したB細胞の初代培養系を用い、細胞内遊離カルシュウム濃度の動態およびインスリン分泌を指標にして、パンクレアスタチンによるインスリン分泌抑制の作用機構を検討した。パンクレアスタチンは、膵島B細胞から分泌され、グルコースによるインスリン分泌を抑制することが知られているが、その作用機構については不明である。膵島B細胞内の遊離カルシュウム濃度はグルコース投与によって上昇したが、この上昇はパンクレアスタチンの投与で濃度依存性に抑制された。さらに検討した結果、パンクレアスタチンはKチャンネルを活性化してカルシュウムの流入を阻害する可能性が指摘された。したがって、ラット膵島から調製したB細胞の初代培養系がパンクレアスタチンに対するアンタゴニストの検出に役立つことが判明した。ペプチド合成に関しては、ペプチド合成法の改良することにより、高収率でペプチドの合成が出来るようになった。また、ニューロペプチドYおよびパンクレアスタチンのアンタゴニスト合成のために、これらのペプチドのC末端構造に焦点を合わせ、一連のアナログおよびアナログ混合物を合成し、上記の方法でスクリーニングを行なった。
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