臓器特異的なムチンの検出系と発現系の確立

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05557104
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 入村 達郎 東京大学, 薬学部, 教授 (80092146)
• 研究分担者: 高山 博夫 ヤクルト中央研究所, 研究員 ; 山本 一夫 東京大学, 薬学部, 助手 (20174782) ; 今井 康之 東京大学, 薬学部, 助手 (80160034) ; 辻 勉 東京大学, 薬学部, 助教授 (00143503)
• キーワード: ムチン / モノクローナル抗体 / レクチン / 細胞認識 / グリコシレーション / 腸内細菌

研究概要

ヒトの上皮性のムチンの検出系と発現系を確立することを目的として、モノクロナルこうたいの作製、リコンビナント遺伝子を用いた発現ベクターの作製、及び培養細胞によるそれらの発現を行なった。(1)種類の異なるヒトムチンのコアペプチドの各種臓器の粘膜上皮に於ける発現量を検出定量できる抗体の開発を行うことを目的として、ヒトMUC1ムチンコアペプチドのC末端に近いグリコシレーションを受けない部分の15-20オリゴペプチドを合成し、これに対するポリクロナル抗体とモノクロナル抗体を作製中である。また、新しい抗MUC1ムチンモノクロナル抗体を作製した。(2)ムチンのコアペプチド(MUC1およびMUC2)のグリコシレーションを受ける部分を含むキメラ分子のリコンビナント遺伝子を作製した。これらをヒト上皮細胞に発現することに成功した。これらのグリコシレーションのパターンを解析中である。(3)一つの細胞集団由来のバリアント細胞で,MUC1ムチンの発現があるものとないものとを見いだし、発現がないものを用いてMUC1ムチン強制発現系を作製した。(5)ヒト腸内常在性細菌菌体から、大腸ムチンに結合する分子を単離しその一次構造を明かにした。これに基づき、遺伝子を取得,構造解析を行なっている。

研究成果

• [文献書誌] Nagata,K.: "Activated platelets induce superoxide anion release by monocytes and neutrophils throogh P-selectin(CD62)" J.Immunol.151. 3267-3273 (1993)
• [文献書誌] Kawashima,H.: "Purification and characterization of UDP-GlcNAc:Gal β1-4Glc(NAc)β1,3-N-acetylglycosaminyltranferase(Poly-N-acetyllactosamine〜." J.Biol.Chem.268. 27118-27126 (1993)
• [文献書誌] Nakamori,S.: "MUC1 mucin expression as a maker of progression and metastasis of human colorectal carcinoma." Gastroenterology. (発表予定). (1993)
• [文献書誌] Takeuchi,K.: "Intercellular adhesion induced by anti-α3 integrin(VLA-3)antibodies." Exp.Cell.Res.211(発表予定). (1993)
• [文献書誌] Imai,Y.: "Quantitative measurement of carbohydrate binding activity of mouse macrophage lectin." J.Immunol.Meth.(発表予定). (1993)
• [文献書誌] Konami,Y.: "A unique amino acid sequence involved in the putative carbohydrate-binding domein of alegume lectin specific for sialylated carbohydrate〜." J.Biochem.(発表予定). (1993)
• [文献書誌] Konami,Y.: "A unique amino acid sequence involved in the putative carbohydrate-binding domein of alegume lectin specific for sialylated carbohydrate〜." J.Biochem.(発表予定). (1993)Irimura,T.: