| 研究概要 |
ヒト・ゲノム解析に重要な十数塩基配列を選択的に切断する人工制限酵素として、亜鉛フィンガーと呼ばれるDNA結合性のタンパク質に、活性酸素を発生するニッケル錯体化合物をつなげた化合物を遺伝子工学的に創製した結果、通常のDNA制限酵素よりも長めの配列を選択的に切ることが明らかになった。従って、亜鉛フィンガーの数を増加させれば、認識塩基の数もふえることになり、このモチーフを用いれば、長い塩基配列の認識に大きな多様性をもたらす一般的概念を与えることが期待される。このような亜鉛フィンガーの幅広いDNA塩基認識能を基礎としたヒト・ゲノム解析用の人工制限酵素の開発を展開するため、AT認識型亜鉛フィンガーの創製を目指した。すなわち、転写因子Sp1の亜鉛フィンガー2のR, E, Rの3つのアミノ酸を転写因子CF2の亜鉛フィンガー5のV, Y, Kに置換した。得られた亜鉛フィンガー蛋白質のDNA認識はGCからATへの移動が見られた。それ故、亜鉛フィンガーモチーフの人工制限酵素開発への有用性が強く示唆された。他方、DNA切断ハサミとして強力なエンジイン核を含む天然抗生物質によるDNA2本鎖同時切断のメカニズムを明らかにし、エンジインの本領域への応用が期待される。
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