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1993 年度 実績報告書

カイコ卵の休眠覚醒期における酵素誘導機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 05660063
研究機関名古屋大学

研究代表者

柳沼 利信  名古屋大学, 農学部, 講師 (60135332)

キーワードカイコ / 卵 / 休眠覚醒 / ソルビトール脱水素酵素
研究概要

カイコ休眠卵を5℃に約2-3ヶ月間保護することによって休眠が覚醒する。この休眠覚醒期にソルビトール脱水素酵素(SDH)活性及びタンパク質が出現することが、既に、私達によって明らかにされている。本研究では、SDHの生合成が転写のレベルで調節されているかどうかを明らかにすることを目的とした。
カイコ幼虫の脂肪体のpoly(A)-RNAから作製されたcDNAライブラリーから、抗SDH血清に反応するクローンを得、インサートDNAの塩基配列を決定した。推定されるアミノ酸配列は、これまでに明らかにされている哺乳類のSDHのアミノ酸配列と類似していた。
このcDNAを用いたノーザン・ハイブリダイゼーションの結果から、また、reverse transcription/polymerase chain reaction法により、休眠卵では、SDH mRNAが冷蔵40-50日から出現・増加することが明かとなった。また、SDH mRNAは胚子細胞よりはむしろ卵黄細胞に局在することが判明した。このことは、5℃冷蔵によるSDH活性の誘導は、mRNAのレベルで調節されていることを示している。
さらに、SDH cDNAを用いて、カイコのゲノムライブラリーからスクーリニングを行い、陽性クローンを得、インサートDNAの塩基配列を決定した。カイコのSDH遺伝子は約10kbにわたり、8つのエクソンから成ること、5'-上流域には5つのTATA boxがあることが明かとなった。今後は、低温によるSDH遺伝子発現に係わる転写因子の解明が課題となった。

  • 研究成果

    (2件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (2件)

  • [文献書誌] Teruyuki NIIMI: "A cold-inducible Bombyx gene encoding a protein similar to mammalian sorbitol dehydrogenase" Eur.J.Biochem.213. 1125-1131 (1993)

  • [文献書誌] Teruyuki NIIMI: "Developmental profile of the gene expression of a Bombyx homolog of mammalian sorbitol dehydrogenase in non-diapause eggs" Comp.Biochem.Physiol.106B. 437-442 (1993)

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公開日: 1995-02-08   更新日: 2016-04-21  

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