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動物細胞において、生合成された新生ポリペプチド鎖のうち間違った構造が形成されて正常な機能を欠いたタンパク質は生命維持のために危険であり、小胞体内で分解されることが示されつつある。著者はこの分解を司ると考えられる全く新しいタイプのシステインプロテアーゼを、ラット肝臓の小胞体から世界に先駆けて単離することに成功した。ER-60プロテアーゼ及びER-72プロテアーゼと命名したこれらのシステインプロテアーゼの活性中心とその性質を分子レベルで解析することを目的に研究を行い、平成6年度は以下の研究実績を挙げた。
1.ER-60プロテアーゼとER-72プロテアーゼの性質を解析し、これらが他の既知のシステインプロテアーゼとは異なる特異な性質を有することを見いだした。
2.ヒトER-60プトテアーゼのcDNAのクローニング
平成5年度にクローニングしたラットER-60プロテアーゼのcDNAを用いてヒトのcDNAを、Chang liver細胞から作製したcDNAライブラリーからクローニングした。さらにその全塩基配列を決定した。
3.ラット及びヒトER-60プロテアーゼの大量発現系の確立
平成5年度に確立したラットER-60プロテアーゼの大腸菌での発現系をさらに改良し、大量にラット及びヒトER-60プロテアーゼタンパク質を得ることに成功した。
4.(3)により得られたタンパク質の結晶化を試み、いくつかの結晶化条件を見いだした。
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