1993 年度実績報告書

アラキドン酸12-リポキシゲナーゼ遺伝子の発現調節機構に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号	05670126
研究機関	徳島大学
研究代表者	吉本谷博徳島大学, 医学部, 助教授 (60127876)
キーワード	アラキドン酸 / 12-リポキシゲナーゼ / 遺伝子 / 転写調節機構 / HEL細胞
研究概要	アラキドン酸12-リポキシゲナーゼは、アラキドン酸などの炭素20個の不飽和脂肪酸の12番目の炭素に分子状酸素を導入して、12-ヒドロペルオキシエイコサテトラエン酸を生成する酸素添加酵素である。これまで私達は、ヒトを含めたいくつかの動物種の12-リポキシゲナーゼの酵素学的・免疫学的研究ならびに分子生物学的研究によって、12-リポキシゲナーゼには『血小板型』および『白血球型』の2種類のアイソフォームが存在することを明らかにした。さらに最近になって、ヒトおよびブタの12-リポキシゲナーゼの遺伝子を単離し、遺伝子の長さはそれぞれ約15Kbと8Kbで、いずれも14個のエクソンから構成されていることを示した。ヒトの12-リポキシゲナーゼ遺伝子のプロモーター領域の配列や、この遺伝子がクロモソーム17番の短腕に存在していることなども明らかにした。今回ヒトの12-リポキシゲナーゼの遺伝子の転写調節機構を調べるために、酵素遺伝子の5'-上流領域をルシフェラーゼ遺伝子の上流に組み込んだプラスミドを構築した。これを12-リポキシゲナーゼを発現しているヒト赤白血病(HEL)細胞にリポフェクション法で導入し、ルシフェラーゼの酵素活性を化学発光によって測定することによって、12-リポキシゲナーゼ遺伝子の発現調節機構を解析した結果、AP-2結合配列領域に遺伝子の発現を抑制する可能性があることが示唆された。今後この因子が、実際に酵素遺伝子の転写調節に関与しているかを調べるために、ゲルシフト法やDNaseIフットプリント法を用いて解析して行く予定である。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Chang,W.-C.: "Induction of arachidonate 12-lipoxygenase mRNA by epidermal growth factor in A431 cells" J.Biol.Chem.268. 18734-18739 (1993)
[文献書誌] Kuhn,H.: "Bacterial expression,purification and partial characterization of recombinant rabbit reticulocyte 15-lipoxygenase" Biochim.Biophys.Acta. 1168. 73-78 (1993)
[文献書誌] Mahmud,I.: "Induction of cyclooxygenase and suppression of 12-lipoxygenase in human erythroleukemia cells upon phorbol ester-induced differentiation" Biochim.Biophys.Acta. 1166. 211-216 (1993)
[文献書誌] Matsuda,S.: "Decreased messenger RNA of arachidonate 12-lipoxygenase in platelets of patients with myeloproliferative disorders" Biochim.Biophys.Acta. 1180. 243-249 (1993)
[文献書誌] Suzuki,H.: "Site-directed mutagenesis analysis of arachidonate 12-lipoxygenase of porcine leukocytes" Biochim.Biophys.Acta. (in press).
[文献書誌] Yokoyama,C.: "Expression of human thromboxane synthase using a Baculovirus system" FEBS Letters. 318. 91-94 (1993)
[文献書誌] Yamamoto,S.: "Current Aspects of Blood Coagulation,Fibrinolysis,and Platelets" Springer-Verlag, 165-170 (1993)
[文献書誌] Yamamoto,S.: "Advances in Polyunsaturated Fatty Acid Research" Elsevier Science Publishers B.V., 7-12 (1993)

1993 年度 実績報告書

アラキドン酸12-リポキシゲナーゼ遺伝子の発現調節機構に関する研究

研究代表者

吉本 谷博 徳島大学, 医学部, 助教授 (60127876)

研究成果

[文献書誌] Chang,W.-C.: "Induction of arachidonate 12-lipoxygenase mRNA by epidermal growth factor in A431 cells" J.Biol.Chem.268. 18734-18739 (1993)

[文献書誌] Kuhn,H.: "Bacterial expression,purification and partial characterization of recombinant rabbit reticulocyte 15-lipoxygenase" Biochim.Biophys.Acta. 1168. 73-78 (1993)

[文献書誌] Mahmud,I.: "Induction of cyclooxygenase and suppression of 12-lipoxygenase in human erythroleukemia cells upon phorbol ester-induced differentiation" Biochim.Biophys.Acta. 1166. 211-216 (1993)

[文献書誌] Matsuda,S.: "Decreased messenger RNA of arachidonate 12-lipoxygenase in platelets of patients with myeloproliferative disorders" Biochim.Biophys.Acta. 1180. 243-249 (1993)

[文献書誌] Suzuki,H.: "Site-directed mutagenesis analysis of arachidonate 12-lipoxygenase of porcine leukocytes" Biochim.Biophys.Acta. (in press).

[文献書誌] Yokoyama,C.: "Expression of human thromboxane synthase using a Baculovirus system" FEBS Letters. 318. 91-94 (1993)

[文献書誌] Yamamoto,S.: "Current Aspects of Blood Coagulation,Fibrinolysis,and Platelets" Springer-Verlag, 165-170 (1993)

[文献書誌] Yamamoto,S.: "Advances in Polyunsaturated Fatty Acid Research" Elsevier Science Publishers B.V., 7-12 (1993)

1993 年度実績報告書

吉本谷博徳島大学, 医学部, 助教授 (60127876)