胃癌の進展・転移に深く関与する6.0Kb c-met異常転写産物の分子クローニング

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05670175
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 横崎 宏 広島大学, 医学部, 講師 (10200891)
• キーワード: 胃癌 / 癌遺伝子 / c-met / 異常転写産物 / 分子クローニング

研究概要

1.平成6年度の研究経過
(1)胃癌におけるc-met癌遺伝子領域を含めた第7番染色体の対立遺伝子欠失について多数症例を用いた詳細な研究を行い,論文発表した(Kuniyasu,H.,Yokozaki,H.,et al.Int.J.Cancer,59:597-600,1994).
(2)前年度に胃癌培養株KATO-IIIcDNAライブラリーより得られた2クローンの塩基配列解析を行ったが,いずれもc-metの部分的配列を含むのみであり,full lengthの6.0Kb c-met cDNAは得られなかった。また、pAP3 neoライブラリーでのクローニングでも、同様の結果であった.
(3)c-met cDNAの種々の部位に対するオリゴヌクレオチドプライマーを用いたRNA-PCR法による異常スプライシングの検索では,c-met cDNAの5'側で増幅困難な部位が存在することが明らかになった.
2.平成6年度の研究の評価
(1)現在までに,cDNAライブラリーからのクローニングを進めてきたが,標的となる転写産物が6.0Kbと大きくfull lengthのcDNAを得ることが困難であった.今後,ヒト末梢血リンパ球genomic libraryよりのクローニング等,方法論の検討が必要とみなされた.
(2)RNA-PCR法でc-met cDNAの5'側で増幅困難な部位が存在することより,6.0Kb異常転写産物が,c-metの5'側におけるスプライシングの異常によって生成される可能性が示唆された.

研究成果

• [文献書誌] Yokozaki,H.: "Expresssion of CD44 abnormal transcriptos in human gastric carcinomas" Cancer Letters. 83. 229-234 (1994)
• [文献書誌] Kuniyasu,H.: "Frequent loss of heterozygosity of the long arm of chromosome 7 is closely associated with progression of human gastric carcinomas" International Journal of Cancer. 59. 597-600 (1994)
• [文献書誌] Ayhan,A.: "Loss of heterozygosity at the bcl-2 gene locus and expression of bcl-2 gene in gastric and colorectal carcinomas" Japanese Journal of Cancer Research. 85. 584-591 (1994)
• [文献書誌] Lotan,R.: "Expression of a 31-kDa lactoside-binding lectin in normal human gastric mucosa and in primary and metastatic gastric carcinomas" International Journal of Cancer. 56. 474-480 (1994)
• [文献書誌] Tannapfel,A.: "Effect of hepatocyte growth factor on the expression of E-and P-cadherin in gastric carcinoma cell lines" Virchows Archiv. 425. 139-144 (1994)
• [文献書誌] Nakamura,T.: "Gann Monograph on Cancer Research 42,“Growth Factors:Cell Growth,Morphogenesis,and Transformation"" CRC Press, 178 (1994)
• [文献書誌] 出月康夫: "外科臨床ハンドブックシリーズ5/外科医臨床の分子生物学" 中山書店, 302 (1994)