| 研究課題/領域番号 |
05670176
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
蓮井 和久 鹿児島大学, 医学部, 講師 (70198703)
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| 研究分担者 |
後藤 正道 国立療養所敬愛園, 研究検査科, 科長
佐藤 栄一 鹿児島大学, 医学部, 教授 (60004579)
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| キーワード | HTLV-1 / In-situ-hybridization / Malignant lymphoma / PCR / Antigen retrieval / Immuno Max |
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| 研究概要 |
研究の最終年度(3年目)であったので、1)probesの標識物の検討、2)HTLV-1pX Taxの活性化とISHで評価出来るヒト遺伝子の活性化の相関の検討、3)ATLLとHAMの各臓器でのISH陽性細胞の分布の検討を計画し、この研究をまとめる予定であった。
しかし、今年度に実施したHTLV-1pX Tax mRNAのISHとHTLV-1関連蛋白の免疫組織化学の比較検討及び高感度免疫組織化学的検出法の導入の検討により、この研究で開発した高度biotin標識probesによるISHを更に改善した感度の高いISHの確立の可能性とHTLV-1の感染細胞内での作用の解析にはその高感度ISHと高感度免疫組織化学が必要とされることが明らかとなった。すなはち、HTLV-1pX Tax蛋白(p40tax)の他の遺伝子の活性化は核内遺伝子調節蛋白との共同作用にて行われるが、従来の免疫組織化学では核内p40taxの標識は不十分である(1995年病理学会、日本網内系学会、日本癌学会で発表)。また、HTLV-1pX TaxのmRNAとHTLV-1envの遺伝子産物の発現の比較ではISHによるHTLV-1遺伝子とヒト遺伝子の活性化の相関は検討出来ない(1995年国際レトロウイルス学会で発表)。抗原回復法と高感度免疫組織化学(1996年病理学会で発表予定)により、凍結免疫組織化学や従来の免疫組織化学で検出不十分であった核内p40taxの検出が可能となった(1996年網内系学会で発表予定)。この免疫組織化学は従来の方法の1000倍の検出感度があり、probesの標識物での相違を無視出来るものである。以上の研究の進展により、2)と3)の研究計画はこの研究の方法の技術水準を超えるものであることが明らかとなった。
ヒトHTLV-1感染の実態と関連疾患の病態形成を解析出来る技術水準を得るために、"HTLV-1の組織化学的検出法の確立"という研究計画を立案し、平成8年度の新しい研究計画・科学研究費申請を行った。
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