1994 年度実績報告書

ジヒドロプテリジン還元酵素欠損症の分子遺伝学的研究

研究課題

研究課題/領域番号	05670651
研究機関	東北大学
研究代表者	松原洋一東北大学, 医学部, 助教授 (00209602)
研究分担者	鈴木洋一東北大学, 医学部, 助手 (80216457)
キーワード	ジヒドロプテリジン還元酵素 / 遺伝子変異 / フェニルケトン尿症 / ビオプテリン / PCR
研究概要	前年度に引き続き、高フェニルアラニン血症と重篤な中枢神経障害をきたすジヒドロプテリジン還元酵素(DHPR)欠損症における変異遺伝子解析を行なった。また、この変異解析に不可欠なDHPR遺伝子のゲノム構造はこれまでに報告されていないため、その決定をあわせて行なった。対象は日本人兄弟の症例で、その線維芽細胞におけるDHPR-mRNA量は著明に低下していた。PCR法によってmRNAを増幅したところ、152塩基の挿入配列が認められ、その中には終止コドンが存在していた。この終止コドンの存在によってmRNAの安定性が低下するため、その量的な変化を招いたものと考えられた。挿入配列部分を含むDHPR遺伝子のゲノム構造解析を行なった結果、この挿入塩基はエキソン3とエキソン4の接合部に位置しており、イントロン3に由来するものであることが判明した。さらに、本症例では挿入配列に隣接してA→G置換が認められた。この塩基置換はmRNAスプライシングのドナー部位に類似した配列を生じるため、上流に存在する潜在的なアクセプター部位を活性化し、その結果このイントロン部分を新たなエキソンとして認識したものと考えられた。患者兄弟はともにこの変異のホモ接合子で、その母親はヘテロ接合子であった。父親はすでに死亡しており、その検体を得ることができなかったが、いとこ婚であることから、父親も本変異のヘテロ接合子の可能性が高いと考えられる。このようにイントロンの一部を島状にエキソンとして認識するような変異は極めて珍しく、これまでにほとんど報告されていない。一方、DHPR遺伝子のゲノム構造解析によれば、本遺伝子は6個のエキソンより構成されており、そのエキソン-イントロン境界はすべてGT/AGの法則に従っていることが明かとなった。この結果は、今後の遺伝子変異解析にとって有用であると考えられる。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Y.Yao,Y.Matsubara,他: "Rapid detection of phenylketonuria mutations by non-radioactive single-strand conformation poly morphism analysis" Acta Paediatrica Japonica. 36. 231-235 (1994)
[文献書誌] M.Ogasawara,Y.Matsubara 他: "Identification of two novel mutations in the methylmalonyl-CoA mutase gene with decreased levels of mutant mRNA in methylmalonic acidemia" Human Molecular Genetics. 6. 867-872 (1994)
[文献書誌] M.Aoki,M.Ogasawara,Y.Matsubara 他: "Familial amyotrophic lateral sclerosis(ALS)in Japan associated with H46R mutation in Cu/Zn superoxide dismutase gene" Journal of the Neurological Sciences. 126. 77-83 (1994)
[文献書誌] K.Arakawa,K.Uetanaka 他: "Analysis of PCR-product by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection and its application to the diagnosis of MCAD deficiency" Journal of Chromatography A. 680. 517-523 (1994)
[文献書誌] y.Suzuki,Y.Aoki 他: "Isolation and characterization of mutations in the human holocarboxylase synthetase cDNA" Nature Genetics. 8. 122-128 (1994)
[文献書誌] 松原洋一、池田博行他: "新生児マススクリーリング対象疾患における新知見と展望:BH_4欠乏症" 小児内科. 26. 82-85 (1994)
[文献書誌] 松原洋一他: "臨床DNA診断法" 金原出版 (出版予定), (1995)
[文献書誌] 松原洋一他: "最新内科学大系" 中山書店 (出版予定), 8および69

1994 年度 実績報告書

ジヒドロプテリジン還元酵素欠損症の分子遺伝学的研究

研究代表者

松原 洋一 東北大学, 医学部, 助教授 (00209602)

研究成果

[文献書誌] Y.Yao,Y.Matsubara,他: "Rapid detection of phenylketonuria mutations by non-radioactive single-strand conformation poly morphism analysis" Acta Paediatrica Japonica. 36. 231-235 (1994)

[文献書誌] M.Ogasawara,Y.Matsubara 他: "Identification of two novel mutations in the methylmalonyl-CoA mutase gene with decreased levels of mutant mRNA in methylmalonic acidemia" Human Molecular Genetics. 6. 867-872 (1994)

[文献書誌] M.Aoki,M.Ogasawara,Y.Matsubara 他: "Familial amyotrophic lateral sclerosis(ALS)in Japan associated with H46R mutation in Cu/Zn superoxide dismutase gene" Journal of the Neurological Sciences. 126. 77-83 (1994)

[文献書誌] K.Arakawa,K.Uetanaka 他: "Analysis of PCR-product by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection and its application to the diagnosis of MCAD deficiency" Journal of Chromatography A. 680. 517-523 (1994)

[文献書誌] y.Suzuki,Y.Aoki 他: "Isolation and characterization of mutations in the human holocarboxylase synthetase cDNA" Nature Genetics. 8. 122-128 (1994)

[文献書誌] 松原洋一、池田博行 他: "新生児マススクリーリング対象疾患における新知見と展望:BH_4欠乏症" 小児内科. 26. 82-85 (1994)

[文献書誌] 松原洋一 他: "臨床DNA診断法" 金原出版 (出版予定), (1995)

[文献書誌] 松原洋一 他: "最新内科学大系" 中山書店 (出版予定), 8および69

1994 年度実績報告書

松原洋一東北大学, 医学部, 助教授 (00209602)

[文献書誌] 松原洋一、池田博行他: "新生児マススクリーリング対象疾患における新知見と展望:BH_4欠乏症" 小児内科. 26. 82-85 (1994)

[文献書誌] 松原洋一他: "臨床DNA診断法" 金原出版 (出版予定), (1995)

[文献書誌] 松原洋一他: "最新内科学大系" 中山書店 (出版予定), 8および69