1993 年度実績報告書

コレステロール逆転送系の動脈硬化防御機構に関する分子生物学的研究-脂質転送蛋白及び肝性リパーゼトランスジェニック動物を用いた解析-

研究課題

研究課題/領域番号	05670859
研究機関	大阪大学
研究代表者	山下静也大阪大学, 医学部, 助手 (60243242)
研究分担者	酒井尚彦大阪大学, 医学部・付属病院, 医員中村正大阪大学, 医学部, 助手 (90252668) 野崎秀一大阪大学, 医学部, 助手 (30252646) 徳永勝人大阪大学, 医学部, 講師 (70159044) 松沢佑次大阪大学, 医学部, 教授 (70116101)
キーワード	動脈硬化 / コレステロール逆転送系 / 脂質転送蛋白 / 肝性リパーゼ / トランスジェニック動物
研究概要	高比重リポ蛋白(HDL)は動脈硬化防御作用を有し、動脈硬化巣からコレステロールを汲み出し、肝臓へ運んで処理するコレステロール逆転送系の主役である。我々はHDLから他のリポ蛋白へとコレステロールエステルを転送する脂質転送蛋白(CETP)や肝性リパーゼ(HTGL)の欠損に起因する高HDL血症を発見し、その遺伝子異常の解析やリポ蛋白代謝異常の検討を行なってきた。本年度の研究では、CETP欠損症の遺伝子解折をさらに推し進め、新しいミスセンス変異を発見し、本変異が本邦では高頻度に存在することも確認した。さらに、CETPの生理的意義を解明するため、CETP活性を欠損するラットに精製した高濃度のCETPを静注し、そのリポ蛋白の変動を観察した。その結果、LDLはコレステロールに冨み、HDLはコレステロールに乏しくなり、HDLの粒子経も縮小し、リポ蛋白のremodellingにCETPが重要であることを示唆するデータを得た。さらに、ラットにLipofection法によるヒトCETP遺伝子の導入を試み、そのリポ蛋白代謝に及ぼす影響を検討した。本法はSendai virusの持つ細胞融合能と核蛋白HMG1の核への移行性を利用する方法で、効率良く遺伝子発現が可能な方法である。CETP遺伝子は経門脈的に導入し、血中CETP活性の上昇を確認すべく、活性測定を行なったが、軽度の上昇に留まり、また血清リポ蛋白の変動も軽微であった。この原因として発現ベクターの不適合が考えられ、現在新しいベクターを用いて詳細に検討中である。また、HTGL遺伝子のLipofectionによる導入については、HTGLを欠損するウサギに投与すべく、現在minigeneを作製中で、詳細に検討の予定である。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] H.Hiraoka et al.: "Decrease of hepatic triglyceride lipase and increase of cholesteryl ester transfer protein in patients with primary biliary cirrhosis;relationship to abnormalities in high-density lipoprotein." Hepatology. 18. 103-110 (1993)
[文献書誌] N.Sakai et al.: "Extralysosomel degradation of high-density lipoproteins in a human hepatoma cell line,Mahlaru." Biochim Biophys Acta. 1169. 169-175 (1993)
[文献書誌] K.Hirano et al.: "Frequency of intron 14 splicing defect of cholesteryl ester transfer protein gene in the Japanese general populetion;relation between the mutation and hyperalphalipoproteinemia." Atherorclerosis. 100. 85-95 (1993)
[文献書誌] S.Takahashi et al: "A missense mutation in the cholesteryl ester transfer protein gene with possible dominant effects on plasma high density lipoproteins." J.Clin.Invest. 92. 2060-2064 (1993)
[文献書誌] Y.Ueyama et al: "Familial hypercholesterolemia-like syndrome with apolipoprotein E-7 associated with marked Achilles tendon xanthomas and coronary artery disease;a report of two cases." J Intern Med. (in press).
[文献書誌] 山下静也他: "コレステロール逆転送系の分子生物学と動脈硬化防御機構の異常" 日本臨床. 51. 1684-1691 (1993)
[文献書誌] 山下静也他: "新生化学実験講座4 脂質I:中性脂質とリポ蛋白質-9.4 脂質輸送タンパク質" 東京化学同人(日本生化学会編), P.315-318 (1993)
[文献書誌] 山下静也他: "新生化学実験講座4 血管:内皮と平滑筋-12.3.3 LDL,HDL,アポタンパク質" 東京化学同人(日本生化学会編), P.449-455 (1993)

1993 年度 実績報告書

コレステロール逆転送系の動脈硬化防御機構に関する分子生物学的研究-脂質転送蛋白及び肝性リパーゼトランスジェニック動物を用いた解析-

研究代表者

山下 静也 大阪大学, 医学部, 助手 (60243242)

研究成果

[文献書誌] H.Hiraoka et al.: "Decrease of hepatic triglyceride lipase and increase of cholesteryl ester transfer protein in patients with primary biliary cirrhosis;relationship to abnormalities in high-density lipoprotein." Hepatology. 18. 103-110 (1993)

[文献書誌] N.Sakai et al.: "Extralysosomel degradation of high-density lipoproteins in a human hepatoma cell line,Mahlaru." Biochim Biophys Acta. 1169. 169-175 (1993)

[文献書誌] K.Hirano et al.: "Frequency of intron 14 splicing defect of cholesteryl ester transfer protein gene in the Japanese general populetion;relation between the mutation and hyperalphalipoproteinemia." Atherorclerosis. 100. 85-95 (1993)

[文献書誌] S.Takahashi et al: "A missense mutation in the cholesteryl ester transfer protein gene with possible dominant effects on plasma high density lipoproteins." J.Clin.Invest. 92. 2060-2064 (1993)

[文献書誌] Y.Ueyama et al: "Familial hypercholesterolemia-like syndrome with apolipoprotein E-7 associated with marked Achilles tendon xanthomas and coronary artery disease;a report of two cases." J Intern Med. (in press).

[文献書誌] 山下静也 他: "コレステロール逆転送系の分子生物学と動脈硬化防御機構の異常" 日本臨床. 51. 1684-1691 (1993)

[文献書誌] 山下静也 他: "新生化学実験講座4 脂質I:中性脂質とリポ蛋白質-9.4 脂質輸送タンパク質" 東京化学同人(日本生化学会編), P.315-318 (1993)

[文献書誌] 山下静也 他: "新生化学実験講座4 血管:内皮と平滑筋-12.3.3 LDL,HDL,アポタンパク質" 東京化学同人(日本生化学会編), P.449-455 (1993)

1993 年度実績報告書

山下静也大阪大学, 医学部, 助手 (60243242)

[文献書誌] 山下静也他: "コレステロール逆転送系の分子生物学と動脈硬化防御機構の異常" 日本臨床. 51. 1684-1691 (1993)

[文献書誌] 山下静也他: "新生化学実験講座4 脂質I:中性脂質とリポ蛋白質-9.4 脂質輸送タンパク質" 東京化学同人(日本生化学会編), P.315-318 (1993)

[文献書誌] 山下静也他: "新生化学実験講座4 血管:内皮と平滑筋-12.3.3 LDL,HDL,アポタンパク質" 東京化学同人(日本生化学会編), P.449-455 (1993)