| 研究課題/領域番号 |
05670958
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| 研究機関 | 自治医科大学 |
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研究代表者 |
浅野 泰 自治医科大学, 医学部, 教授 (00050500)
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| 研究分担者 |
黒田 豊 自治医科大学, 医学部, 助手 (70240984)
田部井 薫 自治医科大学, 医学部, 講師 (90155234)
草野 英二 自治医科大学, 医学部, 助教授 (50102249)
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| キーワード | ARF / oxidative stress / fluorescence / intraccllular Ca / mcsangium / superoxide / xanthin oxidase / Ca antagonist |
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| 研究概要 |
平成5年度には、腎乳頭部集合尿細管の培養細胞を用い、tert-butyl hydroperoxide(TBHP)によるoxidative stressによる細胞内Ca濃度の変化とpropidium iodideによる細胞生存率との関係の実験を行った。その結果
1)oxidative stressにより細胞内Caは上昇し、それにつれて細胞生存率は低下すること、
2)oxidative stressによる細胞障害は、細胞外Caの除去、Ca拮抗薬であるverapamilの投与、細胞外pHの酸性化により抑制されることが明かとなった。
本年度は、メサンギウム細胞でのTBHPによるoxidative stressによる細胞内Ca濃度の変化と細胞生存率との関係の実験を行った。その結果、TBHPによるoxidative stressは細胞内Caを上昇させると同時にpropidium iodideによる細胞生存率を著明に低下させることが明かとなり、乳頭部集合尿細管細胞と同様の変化が起こることが確認された。しかし、細胞内pHの変化については、BCECFdyeとtert-butyl hydroperoxide(TBHP)が反応してしまうのか、TBHPを加えると細胞内pH測定系にnoiseが入ってしまう。
そこで、細胞内pHの測定は後の問題としてCa拮抗薬、細胞外液Ca除去、浴液酸性化の実験を行うこととした。現在得られているpreliminary dataでは乳頭部集合尿細管に見られたと同様にこれらの操作により生存率の改善があると思われ、現在追加実験中である。
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